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生物制品內(nèi)毒素去除策略——Etoxiclear?內(nèi)毒素親和層析

內(nèi)毒素作為生物藥安全檢項(xiàng),是法規(guī)要求的必檢項(xiàng),所有藥物生產(chǎn)對(duì)于內(nèi)毒素的控制都非常嚴(yán)格(<5EU/kg體重),內(nèi)毒素的去除成為生物藥工藝控制的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。內(nèi)毒素去除目前面臨的困境是比較耗時(shí),同時(shí)去除過程也會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品的損失以及毒性物質(zhì)的引入。所以內(nèi)毒素的去除一直困擾很多企業(yè),特別是在大腸桿菌大規(guī)模生產(chǎn)階段。

 

內(nèi)毒素的去除方法主要有超速離心,離子交換和親和層析的方法,在大規(guī)模生產(chǎn)工藝中內(nèi)毒素的去除主要采用后兩種方式,離子交換原理是結(jié)合帶負(fù)電荷的內(nèi)毒素,對(duì)于質(zhì)粒DNA或者酸性蛋白質(zhì)的內(nèi)毒素去除效果會(huì)不夠理想所以目前工業(yè)界傾向于親和層析的方法去除內(nèi)毒素。親和層析的好處在于能夠特異性結(jié)合內(nèi)毒素,終產(chǎn)品的損失少(相對(duì)于離子交換),應(yīng)用范圍較廣,包括質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì),同時(shí),也不會(huì)有毒性物質(zhì)的引入。

 

本文將推薦一款來自英國Astrea Bioseparations的Etoxiclear?層析介質(zhì),它是一種高性能、非離子交換、合成的親和層析吸附劑,可經(jīng)濟(jì)高效地去除內(nèi)毒素,支持GMP生產(chǎn),有凝膠和一次性預(yù)裝柱兩種形式產(chǎn)品,滿足不同的工藝需求。

 

什么是EtoxiClear?親和層析?

 

親和層析是一種特殊的蛋白質(zhì)純化方法,其利用生物分子之間的特異相互作用進(jìn)行分離。EtoxiClear?親和層析針對(duì)內(nèi)毒素具有高選擇性和高分辨率,可以更好的去除內(nèi)毒素。親和層析的優(yōu)點(diǎn)在于其高度特異性和高純度,適用于對(duì)純度要求很高的生物制品的生產(chǎn)。雖然過離子柱可以在一定程度上控制內(nèi)毒素水平,但是個(gè)別項(xiàng)目仍然會(huì)有超標(biāo)的可能。EtoxiClear?是市場上非常獨(dú)特的一款去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品,相比于離子層析方法,EtoxiClear?優(yōu)勢包括:

  • 特異性:專為去除內(nèi)毒素而設(shè)計(jì),可特異性去除內(nèi)毒素
  • 高載量:高內(nèi)毒素動(dòng)態(tài)結(jié)合載量> 1,000,000 EU/ml
  • 經(jīng)濟(jì)高效,支持放大;
  • pH兼容范圍:pH 4.0 - pH 8.0,
  • 滿足GMP物料要求,法規(guī)注冊資料完善
  • 低蛋白結(jié)合率通常目的蛋白回收率>90%;
  • 高度穩(wěn)定、人工合成、無毒的親和配基;
  • 有預(yù)裝柱和填料兩種產(chǎn)品形式,可滿足不同需求。
  • 填料耐堿性強(qiáng)0.5M-1M NaOH CIP

 

EtoxiClear?內(nèi)毒素親和填料性能數(shù)據(jù)

 

可擴(kuò)展性

EtoxiClear?已被證明能夠在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模(5mL柱)和工業(yè)規(guī)模(785mL)下有效去除純化的免疫球蛋白溶液中的內(nèi)毒素。

上樣:含有相似起始內(nèi)毒素濃度的IgG蛋白溶液(~5 mg/mL)

 

處理能力強(qiáng)

EtoxiClear?可提供填料預(yù)裝柱兩種形式產(chǎn)品,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。下表可用于估算處理不同規(guī)模樣品所需的柱尺寸。

規(guī)格:EvolveD?柱,5 min保留時(shí)間

 

針對(duì)常用緩沖液的內(nèi)毒素清除數(shù)據(jù)

EtoxiClear?可用于各種緩沖液的內(nèi)毒素去除。下表顯示了細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中常用的各種緩沖液的內(nèi)毒素清除效率,即使較低的起始內(nèi)毒素濃度(~20EU/mL)也可以有較高的內(nèi)毒素清除率。

* 等于或低于檢測限值

 

高內(nèi)毒素清除率

EtoxiClear?具有很高的內(nèi)毒素清除率,可從多種蛋白樣品中進(jìn)行出色的蛋白質(zhì)回收,如下表所示的人血清白蛋白(HSA)和免疫球蛋白(IgG)溶液(均為~9 mg/mL)。

 

HSA樣品內(nèi)毒素清除率99.7%

 

IgG樣品內(nèi)毒素清除率98.9%

 

低蛋白結(jié)合率

與離子交換吸附劑不同,EtoxiClear?顯示出極低的蛋白質(zhì)結(jié)合性,不受蛋白質(zhì)等電點(diǎn)范圍限制,蛋白質(zhì)回收率高(通常高于90%),如下所示:

 

IMG_267

 

EtoxiClear?技術(shù)參數(shù)

 

 

 

產(chǎn)品訂購信息

貨號(hào)

品名

規(guī)格

3250-00010

EtoxiClear (10 mL)

10mL

3250-00025

EtoxiClear (25 mL)

25mL

3250-00100

EtoxiClear (100 mL)

100mL

3250-00500

EtoxiClear (500 mL)

500mL

3250-01000

EtoxiClear (1 L)

1L

6646

EtoxiClear? 4 x 1 mL

4x1mL

6647

EtoxiClear? 4 x 5 mL

4x5mL

6746

EtoxiClear® Column, 1 x 1 mL

1 x 1 mL

6747

EtoxiClear® Column, 1 x 5 mL

1 x 5 mL

4251-00005

EtoxiClear 5 mL Column

5mL

4251-00050

EtoxiClear 50 mL Column

50mL

AS025100-PC3250-G

EtoxiClear 50 mL EvolveS

50mL

4520-PC3250

EtoxiClear?, 200 μL

200μL

 

 

 

Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué),擁有超過30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過21個(gè)生產(chǎn)工藝通過了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地,專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù),解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問題,實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程,完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。

 

 

西美杰是Astrea Bioseparations中國區(qū)代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多信息。

 

 

 

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