亚洲成a人片77777国产_九九精品视频一区二区三区_一级片在线免费播放_精品久久久久久亚洲中文字幕

boutique精品展示

【技術(shù)在線(xiàn)】HCP ELISA方法驗(yàn)證——稀釋線(xiàn)性dilution linearity

稀釋線(xiàn)性(dilution linearity)是驗(yàn)證HCP ELISA方法特異性和準(zhǔn)確性的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)之一,本文詳細(xì)解讀了HCP ELISA方法學(xué)驗(yàn)證中有關(guān)稀釋線(xiàn)性的操作方法與注意事項(xiàng),歡迎了解。 更多>

Mirus Bio新上市轉(zhuǎn)染試劑TransIT?-AAViator,基于逆向工程,最大化的提升AAV滴度和實(shí)心率!

腺相關(guān)病毒 (AAV) 是基因治療中最廣泛使用的傳遞/遞轉(zhuǎn)機(jī)制。近年來(lái),基于A(yíng)AV病毒所開(kāi)發(fā)的基因療法研發(fā)及臨床試驗(yàn)注冊(cè)數(shù)量也呈指數(shù)級(jí)增長(zhǎng),也需要AAV病毒生產(chǎn)工藝及產(chǎn)能的不斷優(yōu)化及擴(kuò)展,從最早基于貼壁細(xì)胞工藝升級(jí)轉(zhuǎn)換到以懸浮為主的200-2000L反應(yīng)體系。 Mirus Bio成立于1996年,在核酸遞送領(lǐng)域深耕多年,于2021年8月推出GMP級(jí)別TransIT-VirusGEN® GMP 轉(zhuǎn)染試劑,支持AAV及LV從科研到GMP商業(yè)化生產(chǎn)。不同于傳統(tǒng)基于單組分的轉(zhuǎn)染試劑(如陽(yáng)離子聚合物聚乙烯亞胺,PEI),Mirus Bio將專(zhuān)利的多聚物及脂質(zhì)技術(shù)進(jìn)行多重組合,形成多功能性的轉(zhuǎn)染方案,克服細(xì)胞遞轉(zhuǎn)過(guò)程中的多重阻礙,以實(shí)現(xiàn)更高效轉(zhuǎn)染和更低細(xì)胞毒性,從而大幅度提升多種血清型AAV病毒生產(chǎn)載量。去年7月底Mirus上市RevIT? AAV Enhancer,已證明在不同AAV血清型別中,可提高AAV病毒基因組滴度1.2-4.9倍,并且在一定程度改善了實(shí)心率。更重要的是,RevIT? AAV Enhancer不僅可以搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 轉(zhuǎn)染試劑,也適配于其他轉(zhuǎn)染試(如PEI等),使得AAV生產(chǎn)上游成本的進(jìn)一步降低成為可能,進(jìn)而降低了基因治療單劑量成本。下圖展示了國(guó)內(nèi)客戶(hù)前期測(cè)試反饋結(jié)果,測(cè)試包括了不同血清型別的質(zhì)粒設(shè)計(jì),適用于國(guó)內(nèi)及國(guó)外品牌的轉(zhuǎn)染試劑、細(xì)胞及培養(yǎng)基體系,實(shí)現(xiàn)了1.5-4倍以上的AAV病毒滴度提升。 RevIT Enhancer在國(guó)內(nèi)客戶(hù)不同AAV項(xiàng)目平臺(tái)上的測(cè)試反饋結(jié)果 隨著國(guó)內(nèi)外客戶(hù)項(xiàng)目及管線(xiàn)推進(jìn),已有越來(lái)越多的客戶(hù)將TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑以及RevIT? AAV Enhancer從搖瓶階段線(xiàn)性放大至200L-500L反應(yīng)器,并且已應(yīng)用到處于臨床申報(bào)產(chǎn)品中。ReciBioPharm 與Mirus Bio合作, Chris Brown(工藝流程開(kāi)發(fā)部門(mén))在線(xiàn)上(鏈接)展示了TransIT-VirusGEN 和RevIT? AAV Enhancer數(shù)據(jù)結(jié)果,并且比較了所有測(cè)試規(guī)模(搖瓶&反應(yīng)器),反饋病毒滴度放大效果非常好,并且實(shí)心率也保持相同水平,在 50 升的生物反應(yīng)器中,也有著40%以上實(shí)心率。Chris Brown表示“選擇用TransIT-VirusGEN 和RevIT? AAV Enhancer產(chǎn)品,是基于我們以往的測(cè)試數(shù)據(jù),允許最大限度地提高 AAV 產(chǎn)量。產(chǎn)量的提高,單個(gè)50 升生物反應(yīng)器可生產(chǎn)更多劑量,從而降低單位劑量的成本。” 更多的,Bridgebio在poster中分享了基于A(yíng)AV5型別,使用TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑以及RevIT? AAV Enhancer從搖瓶線(xiàn)性放大至200L反應(yīng)體系(125mL搖瓶→2L → 10L → 200L),病毒滴度和實(shí)心率數(shù)據(jù)結(jié)果(圖1)。與原有工藝相比 (Process A:PEIPro轉(zhuǎn)染 + Expi293細(xì)胞/培養(yǎng)基),替換成TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑后的工藝流程 (Process B:TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑 + Expi293細(xì)胞 + BalanCD培養(yǎng)基;Process C:TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑 + VP2.0細(xì)胞 + BalanCD培養(yǎng)基)均有著更高的病毒滴度(圖2)和更低的宿主DNA和質(zhì)粒DNA殘留。 圖1. 從125mL搖瓶線(xiàn)性放大至200L反應(yīng)體系的病毒滴度和實(shí)心率數(shù)據(jù)結(jié)果 圖2. 采用Mirus的工藝平臺(tái)均有著更高的病毒滴度 Mirus Bio 并沒(méi)有止步于此,并于2024年10月7日重磅推出 TransIT®-AAViator AAV轉(zhuǎn)染試劑。繼續(xù)沿用Mirus Bio 多聚物及脂質(zhì)兩組分的經(jīng)典組合,不同的是應(yīng)用逆向工程思維,基于現(xiàn)有RevIT? AAV Enhancer,從Mirus Bio多聚物及脂質(zhì)庫(kù)中,分別篩選出更優(yōu)化的脂質(zhì)和聚合物配方。新推出的TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染體系,進(jìn)一步降低了 AAV工藝生產(chǎn)流程中所需質(zhì)粒 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑使用量,最大限度地提高不同AAV血清型滴度和實(shí)心率,從而提升 AAV生產(chǎn)工藝的總體生產(chǎn)效率。整合TransIT®-AAViator的AAV病毒上游生產(chǎn)工藝,無(wú)需通過(guò)細(xì)胞密度而調(diào)整試劑和質(zhì)粒DNA加入量,并且實(shí)現(xiàn)了單個(gè)生物反應(yīng)器的生產(chǎn)劑量的成倍增加,大幅度降低了單位劑量的成本,為基于A(yíng)AV 病毒的基因治療開(kāi)發(fā)提供了更優(yōu)的解決方案。 產(chǎn)品詳情 產(chǎn)品名稱(chēng): TransIT®-AAViator Transfection System 上市日期:2024年10月7日 產(chǎn)品貨號(hào): MIR 73750 / MIR 73745 產(chǎn)品組分:TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染試劑及RevIT? AAV增強(qiáng)子 Mirus Bio AAV病毒生產(chǎn)相關(guān)轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品參數(shù) * HDPE材質(zhì)管/瓶 *只針對(duì)30 mL以及150 mL 規(guī)格試劑 **只針對(duì)150 mL 規(guī)格試劑 TransIT-AAViator®提升AAV生產(chǎn)效率&降低單劑量成本 生產(chǎn)劑量的成倍增加 隨著AAV病毒滴度的提升,單個(gè)反應(yīng)器所允許生產(chǎn)劑量也成倍的增加,從而大幅度降低單劑量成本。 減少生產(chǎn)所需批次 提高AAV病毒生產(chǎn)總產(chǎn)量,減少每次生產(chǎn)的所需批次數(shù)量或擴(kuò)大生物反應(yīng)器規(guī)模才可滿(mǎn)足生產(chǎn)需求,緩解了由于產(chǎn)能不足等諸多限制。 減少質(zhì)粒DNA用量 TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),降低了至少一半質(zhì)粒 DNA使用量 ,同時(shí)仍可保持高水平的滴度和實(shí)心率,進(jìn)一步降低了批次生產(chǎn)成本。 加快工藝開(kāi)發(fā)進(jìn)程 TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),只需較少實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,即可獲得最佳結(jié)果,從而縮短了工藝開(kāi)發(fā)時(shí)間,加快了產(chǎn)品上市速度。 TransIT®-AAViator有著更高滴度和實(shí)心率 使用不同的質(zhì)粒設(shè)計(jì)(GFP基因-圖3;RPE65 基因-圖4),平行比較TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)與“Poly F”(Polyplus FectoVIR® 病毒轉(zhuǎn)染試劑)以及“Poly P” (Polyplus PEIpro®病毒轉(zhuǎn)染試劑)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在不同AAV血清型別中 (AAV5、8、9),TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)有著更高的病毒滴度及實(shí)心率,當(dāng)質(zhì)粒設(shè)設(shè)計(jì)替換成治療性基因(RPE65 基因),病毒滴度及實(shí)心率相比于競(jìng)爭(zhēng)品牌,其優(yōu)勢(shì)更加顯著。 圖3. 轉(zhuǎn)染GFP基因質(zhì)粒的AAV滴度 圖4. 轉(zhuǎn)染RPE65基因質(zhì)粒的AAV滴度 TransIT®-AAViator降低質(zhì)粒DNA用量 TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染系統(tǒng),在較低質(zhì)粒 DNA 用量仍可得到高水平AAV病毒滴度及實(shí)心率(圖5)。 圖5. 實(shí)驗(yàn)使用TransIT® -AAViator轉(zhuǎn)染試劑(試劑:DNA比例為1.25:1,vol:wt),以 1:1:1 的質(zhì)粒質(zhì)量比轉(zhuǎn)染 pAAV-WPRE-GFP (Aldevron), pAAV-Helper (Aldevron) 和 pAAV-RepCap (AAV9 Genemedi)三質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染時(shí)加入RevIT AAV Enhancer(1 μl/mL),轉(zhuǎn)染后 72 小時(shí)使用化學(xué)裂解法收獲 AAV病毒。 TransIT-AAViator實(shí)驗(yàn)流程 Step 1: 轉(zhuǎn)染前,需保證生長(zhǎng)在培養(yǎng)基中的懸浮 HEK 293 細(xì)胞活率 > 95%。 Step 2: 轉(zhuǎn)染時(shí):建議細(xì)胞密度為 ~ 3 × 10E6 cells/mL,TransIT®- AAViator 試劑與DNA 加入比例為1:1 - 1.5:1,每 1 mL 培養(yǎng)基加入RevIT AAV Enhancer 0.5 - 1.5 μl;靜止條件下孵育15-45 分鐘,以便形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物,然后輕柔的加入細(xì)胞中。 Step 3: 轉(zhuǎn)染后無(wú)需更換培養(yǎng)基,一般可在轉(zhuǎn)染后 48-72 小時(shí)收獲AAV病毒。 客戶(hù)案例分享 最新線(xiàn)上webinar:Enhancing AAV Production: A Novel Transfection System for Cell and Gene Therapy Applications (鏈接) 演講者信息: Webinar內(nèi)容一覽: 通過(guò)該線(xiàn)上Webinar,可了解TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),包括了開(kāi)發(fā)初衷、數(shù)據(jù)性能對(duì)比及展示等。來(lái)自Affinia Therapeutics 高級(jí)工藝開(kāi)發(fā) Michael White, 強(qiáng)調(diào)了該轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的可擴(kuò)展性和工作流程的易整合性,是想要優(yōu)化上游工藝和增加整體成本效益的理想選擇。 此外,Michael White分享了 Affinia Therapeutics AAV轉(zhuǎn)染平臺(tái)體系納入TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)經(jīng)驗(yàn),強(qiáng)調(diào)該系統(tǒng)能夠降低質(zhì)粒DNA用量,同時(shí)也在不同規(guī)模中進(jìn)行了測(cè)試(搖瓶-3L反應(yīng)器),可穩(wěn)定的保持高水平滴度,從而大幅度提高了生產(chǎn)工藝的效率,同時(shí)降低了AAV病毒生產(chǎn)成本。 討論重點(diǎn)包括: Affinia 比較了新一代轉(zhuǎn)染系統(tǒng)TransIT®-AAViator與當(dāng)前使用的平臺(tái)工藝; Affinia 在將TransIT-AAViator® 與其他試劑性能進(jìn)行比較中,如何優(yōu)化使其性能顯著優(yōu)于其他轉(zhuǎn)染試劑; 整合TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染系統(tǒng),相比于優(yōu)化前實(shí)現(xiàn)了3 倍滴度提升及 70% 實(shí)心率。 小結(jié) 新一代專(zhuān)為優(yōu)化AAV 生產(chǎn)工藝而推出的轉(zhuǎn)染試劑: TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng): 與基于單個(gè)組分(如PEI)轉(zhuǎn)染試劑不同,可顯著的提高不同AAV 血清型別的滴度及實(shí)心率; 有著更低轉(zhuǎn)染試劑及質(zhì)粒DNA使用量需求,同時(shí)保持高水平的AAV滴度及實(shí)心率; 相比于競(jìng)爭(zhēng)品牌(FectoVIR&PEIpro等),有著更高基因組滴度及實(shí)心率,并且質(zhì)粒設(shè)計(jì)為治療基因,其優(yōu)勢(shì)更加顯著。 相關(guān)產(chǎn)品信息及鏈接 產(chǎn)品名稱(chēng) 規(guī)格 貨號(hào) NEW! TransIT®-AAViator Transfection System 2 x 1.5 ml MIR 73750 1 × 30 ml MIR 73745 RevIT? AAV Enhancer 1.5 ml MIR 8000 10 x 1.5 ml MIR 8006 75 ml MIR 8080 NEW! RevIT? GMP AAV Enhancer 200 ml MIR 8200-GMP VirusGEN® AAV轉(zhuǎn)染試劑及RevIT? AAV Enhancer For 1L of Culture MIR 8007 For 10L of Culture MIR 8008 TransIT-VirusGEN®轉(zhuǎn)染試劑 0.3 ml MIR 6703 0.75 ml MIR 6704 1.5 ml MIR 6700 5 x 1.5 ml MIR 6705 10 x 1.5 ml MIR 6706 30 ml MIR 6720 TransIT-VirusGEN® GMP級(jí)別轉(zhuǎn)染試劑 150 ml MIR 6845-GMP VirusGEN® AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6750 VirusGEN® GMP級(jí)別AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6815-GMP VirusGEN® LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6760 VirusGEN® GMP級(jí)別LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6825-GMP Mirus成立于1995年,始終秉承著為基因遞轉(zhuǎn)提供優(yōu)化方法及高效的工具。憑借超過(guò) 25 年轉(zhuǎn)染領(lǐng)域的深根細(xì)作,獲得了多項(xiàng)技術(shù)突破,已成為核酸遞送領(lǐng)域的全球領(lǐng)導(dǎo)者和值得信賴(lài)的品牌。Mirus科學(xué)家團(tuán)隊(duì)不斷突破轉(zhuǎn)染技術(shù)的極限,推出了VirusGEN®轉(zhuǎn)染試劑與RevIT?增強(qiáng)劑,進(jìn)一步提升AAV/LV產(chǎn)量,助力推動(dòng)生物治療藥物的降本增效,為CGT領(lǐng)域客戶(hù)賦能。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中國(guó)區(qū)代理,始終秉承著專(zhuān)業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電北京西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

一款適用于細(xì)胞庫(kù)的全能細(xì)胞凍存液Bambanker

Bambanker細(xì)胞凍存液保護(hù)性能好、成分明確且滿(mǎn)足GMP生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn),是生物制品細(xì)胞庫(kù)凍存的理想方案。 更多>

生物制品內(nèi)毒素去除策略——Etoxiclear?內(nèi)毒素親和層析

內(nèi)毒素作為生物藥安全檢項(xiàng),是法規(guī)要求的必檢項(xiàng),所有藥物生產(chǎn)對(duì)于內(nèi)毒素的控制都非常嚴(yán)格(<5EU/kg體重),內(nèi)毒素的去除成為生物藥工藝控制的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。內(nèi)毒素去除目前面臨的困境是比較耗時(shí),同時(shí)去除過(guò)程也會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品的損失以及毒性物質(zhì)的引入。所以?xún)?nèi)毒素的去除一直困擾很多企業(yè),特別是在大腸桿菌大規(guī)模生產(chǎn)階段。 內(nèi)毒素的去除方法主要有超速離心,離子交換和親和層析的方法,在大規(guī)模生產(chǎn)工藝中內(nèi)毒素的去除主要采用后兩種方式,離子交換原理是結(jié)合帶負(fù)電荷的內(nèi)毒素,對(duì)于質(zhì)粒DNA或者酸性蛋白質(zhì)的內(nèi)毒素去除效果會(huì)不夠理想,所以目前工業(yè)界傾向于親和層析的方法去除內(nèi)毒素。親和層析的好處在于能夠特異性結(jié)合內(nèi)毒素,終產(chǎn)品的損失少(相對(duì)于離子交換),應(yīng)用范圍較廣,包括質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì),同時(shí),也不會(huì)有毒性物質(zhì)的引入。 本文將推薦一款來(lái)自英國(guó)Astrea Bioseparations的Etoxiclear?層析介質(zhì),它是一種高性能、非離子交換、合成的親和層析吸附劑,可經(jīng)濟(jì)高效地去除內(nèi)毒素,支持GMP生產(chǎn),有凝膠和一次性預(yù)裝柱兩種形式產(chǎn)品,滿(mǎn)足不同的工藝需求。 什么是EtoxiClear?親和層析? 親和層析是一種特殊的蛋白質(zhì)純化方法,其利用生物分子之間的特異相互作用進(jìn)行分離。EtoxiClear?親和層析針對(duì)內(nèi)毒素具有高選擇性和高分辨率,可以更好的去除內(nèi)毒素。親和層析的優(yōu)點(diǎn)在于其高度特異性和高純度,適用于對(duì)純度要求很高的生物制品的生產(chǎn)。雖然過(guò)離子柱可以在一定程度上控制內(nèi)毒素水平,但是個(gè)別項(xiàng)目仍然會(huì)有超標(biāo)的可能。EtoxiClear?是市場(chǎng)上非常獨(dú)特的一款去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品,相比于離子層析方法,EtoxiClear?優(yōu)勢(shì)包括:高特異性:專(zhuān)為去除內(nèi)毒素而設(shè)計(jì),可特異性去除內(nèi)毒素高載量:高內(nèi)毒素動(dòng)態(tài)結(jié)合載量(> 1,000,000 EU/ml);經(jīng)濟(jì)高效,支持放大;pH兼容范圍廣:pH 4.0 - pH 8.0,滿(mǎn)足GMP物料要求,法規(guī)注冊(cè)資料完善低蛋白結(jié)合率:通常目的蛋白回收率>90%;高度穩(wěn)定、人工合成、無(wú)毒的親和配基;有預(yù)裝柱和填料兩種產(chǎn)品形式,可滿(mǎn)足不同需求。填料耐堿性強(qiáng):0.5M-1M NaOH CIP EtoxiClear?內(nèi)毒素親和填料性能數(shù)據(jù) 可擴(kuò)展性EtoxiClear?已被證明能夠在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模(5mL柱)和工業(yè)規(guī)模(785mL)下有效去除純化的免疫球蛋白溶液中的內(nèi)毒素。上樣:含有相似起始內(nèi)毒素濃度的IgG蛋白溶液(~5 mg/mL) 處理能力強(qiáng)EtoxiClear?可提供填料和預(yù)裝柱兩種形式產(chǎn)品,以滿(mǎn)足不同的實(shí)驗(yàn)需求。下表可用于估算處理不同規(guī)模樣品所需的柱尺寸。規(guī)格:EvolveD?柱,5 min保留時(shí)間 針對(duì)常用緩沖液的內(nèi)毒素清除數(shù)據(jù)EtoxiClear?可用于各種緩沖液的內(nèi)毒素去除。下表顯示了細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中常用的各種緩沖液的內(nèi)毒素清除效率,即使較低的起始內(nèi)毒素濃度(~20EU/mL)也可以有較高的內(nèi)毒素清除率。* 等于或低于檢測(cè)限值 高內(nèi)毒素清除率EtoxiClear?具有很高的內(nèi)毒素清除率,可從多種蛋白樣品中進(jìn)行出色的蛋白質(zhì)回收,如下表所示的人血清白蛋白(HSA)和免疫球蛋白(IgG)溶液(均為~9 mg/mL)。 HSA樣品內(nèi)毒素清除率99.7% IgG樣品內(nèi)毒素清除率98.9% 低蛋白結(jié)合率與離子交換吸附劑不同,EtoxiClear?顯示出極低的蛋白質(zhì)結(jié)合性,不受蛋白質(zhì)等電點(diǎn)范圍限制,蛋白質(zhì)回收率高(通常高于90%),如下所示: EtoxiClear?技術(shù)參數(shù) 產(chǎn)品訂購(gòu)信息貨號(hào)品名規(guī)格3250-00010EtoxiClear (10 mL)10mL3250-00025EtoxiClear (25 mL)25mL3250-00100EtoxiClear (100 mL)100mL3250-00500EtoxiClear (500 mL)500mL3250-01000EtoxiClear (1 L)1L6646EtoxiClear? 4 x 1 mL4x1mL6647EtoxiClear? 4 x 5 mL4x5mL6746EtoxiClear® Column, 1 x 1 mL1 x 1 mL6747EtoxiClear® Column, 1 x 5 mL1 x 5 mL4251-00005EtoxiClear 5 mL Column5mL4251-00050EtoxiClear 50 mL Column50mLAS025100-PC3250-GEtoxiClear 50 mL EvolveS50mL4520-PC3250EtoxiClear?, 200 µL200µL Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué),擁有超過(guò)30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過(guò)21個(gè)生產(chǎn)工藝通過(guò)了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地,專(zhuān)注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù),解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問(wèn)題,實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過(guò)程,完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國(guó)區(qū)代理,為用戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多信息。 更多>

Applichem藥典級(jí)二甲基亞砜DMSO,萬(wàn)能溶劑的卓越之選

二甲基亞砜(DMSO)是一種含硫有機(jī)化合物,因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)中具有一個(gè)親水的亞硫酰基和兩個(gè)疏水的甲基,它既可與水溶液也可與除石油醚外的大多數(shù)有機(jī)溶劑互溶,可以溶解約80%的化合物,具有“萬(wàn)能溶劑”的稱(chēng)號(hào)。在實(shí)驗(yàn)中通常應(yīng)用在以下方面: 1. 細(xì)胞凍存 DMSO是一種有效的低溫保護(hù)劑,能夠在細(xì)胞凍存過(guò)程中減少冰晶形成,降低冰晶對(duì)細(xì)胞的物理?yè)p傷。同時(shí),DMSO能夠提高細(xì)胞膜的透過(guò)性,使細(xì)胞更易于吸收凍存保護(hù)劑,從而提高細(xì)胞在低溫下的存活率。 2. 藥物和化合物的溶解劑 DMSO具有極佳的溶解能力,能夠溶解許多其他溶劑難以溶解的有機(jī)化合物,包括多種藥物,這使得DMSO成為進(jìn)行藥物篩選和細(xì)胞治療研究中的理想溶劑。 3. 作為滲透劑 DMSO的滲透特性使其能夠增加細(xì)胞膜的透性,幫助藥物、DNA等分子進(jìn)入細(xì)胞。 4. 在化學(xué)和生物學(xué)反應(yīng)中的應(yīng)用 在某些化學(xué)合成和酶促反應(yīng)中,DMSO可作為反應(yīng)介質(zhì),促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行或提高反應(yīng)的效率。DMSO還可能影響細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)途徑,對(duì)于研究細(xì)胞生物學(xué)過(guò)程有時(shí)可以是一個(gè)有用的副作用。 PanReac AppliChem的藥典級(jí)二甲基亞砜 (貨號(hào):191954),歐洲生產(chǎn),高純度,超低金屬離子含量,符合ICH Q3D質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),滿(mǎn)足USP, Ph Eur, BP等多國(guó)藥典。質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,供應(yīng)穩(wěn)定,有1L、2.5L、5L、25L、190L多種規(guī)格,滿(mǎn)足不同應(yīng)用和工藝階段需求,一直受到全球客戶(hù)的廣泛青睞。 更多>

Pfanstiehl 喜獲第16個(gè)CDE登記號(hào)-鹽酸氨丁三醇Tris HCL

“ 熱烈祝賀Pfanstiehl的注射級(jí)鹽酸氨丁三醇Tris HCL(T-154)喜獲CDE登記號(hào)F20240000584. 這是Pfanstiehl產(chǎn)品獲得的第16個(gè)CDE登記號(hào)!”生物緩沖劑在生命科學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用。Tris (三羥甲基氨基甲烷) 和Tris HCL是生物制藥行業(yè)應(yīng)用非常廣泛的緩沖液,在維持溶液pH穩(wěn)定方面發(fā)揮著重要作用,Tris Base的應(yīng)用非常廣泛,可用于藥物生產(chǎn)、有機(jī)合成、生物緩沖劑等,而Tris-HCL是Tris和鹽酸(HCL)的混合物,主要作用增加溶液的離子強(qiáng)度,從而穩(wěn)定pH值。Tris-HCL也是其他緩沖液如TBS、TBST、TE等的重要成分。目前藥典對(duì)Tris HCL無(wú)專(zhuān)論,Pfanstiehl將贊助USP設(shè)立Tris HCL的專(zhuān)論。Pfanstiehl的Tris Base和Tris HCL均為注射級(jí)別,具有高純度,超低內(nèi)毒素,超低金屬雜質(zhì)殘留的特點(diǎn),并同時(shí)檢測(cè)各種酶的殘留,如DNA酶,RNA酶,磷酸酶和脂肪酶等,也是全球首款將亞硝酸鹽加入質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的Tris Base和Tris HCL,符合生物制藥和疫苗的生產(chǎn)要求。目前Pfanstiehl的Tris Base和Tris HCL均已完成DMF和CDE的備案。產(chǎn)品信息: · 產(chǎn)品名稱(chēng): Tris HCl, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals· 中文名稱(chēng):鹽酸氨丁三醇· 分子式:C4H12ClNO3· 分子量:157.59g/mol· CAS號(hào):1185-53-1· 產(chǎn)品貨號(hào):T-154產(chǎn)品特點(diǎn):· 高純度,超低內(nèi)毒素,超低微生物含量,超低金屬雜質(zhì)殘留· 質(zhì)量指標(biāo)新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶的檢測(cè)· 符合ICH Q3D標(biāo)準(zhǔn)DNA· 符合GMP標(biāo)準(zhǔn)· CDE登記號(hào):F20240000584· DMF登記號(hào):039584產(chǎn)品應(yīng)用:· 緩沖液 如果您對(duì)Pfanstiehl的Tris Base T-153和Tris HCL T-154感興趣,可聯(lián)系Pfanstiehl 中國(guó)區(qū)代理北京西美杰科技有限公司獲得詳細(xì)的產(chǎn)品概況說(shuō)明文件。也歡迎聯(lián)系獲取測(cè)試樣品。 Pfanstiehl Inc.最新產(chǎn)品系列如下,歡迎聯(lián)系北京西美杰獲取100g裝免費(fèi)樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國(guó)代理,為客戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話(huà)400-050-4006或者登陸網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多信息。 更多>

Cygnus Protein A Mix-N-GoTM ELISA,蛋白A殘留檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)

Cygnus Protein A Mix-N-Go?系列ELISA試劑盒是專(zhuān)為檢測(cè)大多數(shù)天然和重組Protein A殘留而設(shè)計(jì),其采用了革命性的一步法樣品處理程序。相比傳統(tǒng)的Protein A ELISA方法,Mix-N-GoTM系列ELISA試劑盒簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,同時(shí)提高了方法的可靠性。 更多>

GMP RevIT? AAV Enhancer新上市,助力于A(yíng)AV病毒GMP生產(chǎn)

自2023年7月底Mirus上市RevIT? AAV Enhancer以來(lái),RevIT? AAV Enhancer的加入允許不同血清型AAV病毒基因組滴度提高1.2-4.9倍,并且在一定程度提升了實(shí)心率,使得AAV生產(chǎn)上游成本進(jìn)一步降低成為可能,降低了基因治療單劑量成本。由于可輕松靈活的將RevIT整合入現(xiàn)有AAV生產(chǎn)工藝工作流程中,不僅可以搭配Mirus TransIT-VirusGEN&reg; GMP 轉(zhuǎn)染試劑,也適配于其他轉(zhuǎn)染試(如PEI),RevIT? AAV Enhancer得到了國(guó)內(nèi)外AAV客戶(hù)的廣泛認(rèn)可及好評(píng),GMP級(jí)別試劑也按照計(jì)劃如期上市,用于大規(guī)模的AAV GMP生產(chǎn)。 RevIT? AAV Enhancer于2024年9月30日推出GMP級(jí)別,由ISO 13485體系認(rèn)證的工廠(chǎng)生產(chǎn),符合ISO 20399以及USP<1043>標(biāo)準(zhǔn)。自2023年7月28上市的RevIT? AAV Enhancer,已證明在不同血清型、細(xì)胞培養(yǎng)基以及轉(zhuǎn)染平臺(tái)上,可提高至少2-4倍病毒滴度;在保持高質(zhì)量滴度的同時(shí),允許更低質(zhì)粒DNA用量,從而大幅度降低AAV病毒生產(chǎn)成本。 產(chǎn)品詳情 產(chǎn)品名稱(chēng):RevIT? GMP AAV Enhancer 上市日期:2024年9月30日 產(chǎn)品貨號(hào):MIR 8200-GMP 產(chǎn)品規(guī)格:200mL(液體) 更多RevIT? AAV Enhancer數(shù)據(jù)及RevIT? AAV Enhancer詳細(xì)信息,請(qǐng)見(jiàn)微信軟文《新品上市 | RevIT? AAV Enhancer, 提高AAV產(chǎn)量的又一利器!》 RevIT AAV Enhancer 以及TransIT-VirusGEN 轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品參數(shù) * HDPE材質(zhì)管/瓶 *只針對(duì)30 mL以及150 mL 規(guī)格試劑 **只針對(duì)150 mL 規(guī)格試劑 GMP支持詳情 Residual Reagent Assay殘留檢測(cè) Regulatory Support Package 法規(guī)支持文件 Product Safety Risk Assessment | Supplemental Information產(chǎn)品安全性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估| 補(bǔ)充信息 Manufactured and Tested in Alignment with Mirus 生產(chǎn)及檢測(cè)與Mirus標(biāo)準(zhǔn)體系一致 ISO 13485 QM Mirus Bio GMP 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ISO 13485驗(yàn)證體系 Mirus Bio所開(kāi)發(fā)以及供應(yīng)的輔助材料(Ancillary material),可用于細(xì)胞和基因療法的RUO和GMP合規(guī)性工藝生產(chǎn)。 Mirus Bio的質(zhì)量管理體系通過(guò)了ISO 13485認(rèn)證,可用于技術(shù)轉(zhuǎn)讓以及分銷(xiāo)GMP級(jí)輔助材料。 Mirus Bio 開(kāi)發(fā)及實(shí)施以客戶(hù)為中心的質(zhì)量管理體系(QMS),可作為值得信賴(lài)的合作伙伴,滿(mǎn)足細(xì)胞和基因治療客戶(hù)需求的承諾。以下指導(dǎo)文件為Mirus Bio建立質(zhì)量管理體系所參考的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)文件: ISO 13485:2016, Medical devices – Quality management systems – Requirements for regulatory purposes ISO 20399:2022, as ancillary materials present during the production of cellular therapeutic products USP<1043>, with respect to Tier 2 ancillary materials for cell, gene and tissue-engineered product 更多客戶(hù)案例分享 最新線(xiàn)上webinar:Pairing a novel enhancer with transfection reagents to enable high-titer rAAV production 演講者信息: Florian Dziopa,MeiraGTx 上游工藝負(fù)責(zé)人(Director of Upstream Process) ,在MeiraGTx工作的過(guò)去六年里,一直致力基于懸浮HEK293細(xì)胞瞬轉(zhuǎn)工藝的AAV生產(chǎn)平臺(tái)優(yōu)化。 René Gantier,Repligen 高級(jí)生物工藝應(yīng)用研發(fā)Director,有著超過(guò)二十年的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)及工藝純化經(jīng)驗(yàn)。 Becky Reese,Mirus Bio研發(fā) 該Webinar可以 (線(xiàn)上觀(guān)看鏈接): 了解如何實(shí)現(xiàn)病毒載體的生產(chǎn)工藝流程優(yōu)化提升; 了解 VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑是如何幫助涉及不同種轉(zhuǎn)染工作流程以及 AAV 血清型的工藝流程,其產(chǎn)量全面提升; 從生產(chǎn)工藝流程角度出發(fā),如何降低細(xì)胞和基因療法的單位劑量成本 簡(jiǎn)化了從技術(shù)評(píng)估到工藝生產(chǎn)的整個(gè)過(guò)程 Poster數(shù)據(jù):Optimizing Key Parameters for AAV5 Clinical Manufacturing: Enhancing Process Productivity and Drug Substance Quality (鏈接) Bridgebio在該poster中分享了基于A(yíng)AV5型別,使用TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑以及RevIT? AAV Enhancer在搖瓶階段線(xiàn)性放大至200L(125mL搖瓶→2L → 10L → 200L)病毒滴度和實(shí)心率數(shù)據(jù)結(jié)果(圖左)。與之前工藝相比 (工藝A:PEIPro轉(zhuǎn)染 + Expi293細(xì)胞/培養(yǎng)基),替換成TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑的工藝流程 (工藝B:TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑 + Expi293細(xì)胞 + BalanCD培養(yǎng)基;工藝C:TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑 + VP2.0細(xì)胞 + BalanCD培養(yǎng)基),有著更高的病毒滴度(圖右)及更低的宿主DNA和質(zhì)粒DNA殘留。 相關(guān)產(chǎn)品信息 產(chǎn)品名稱(chēng) 規(guī)格 貨號(hào) RevIT? AAV Enhancer 1.5 ml MIR 8000 10 x 1.5 ml MIR 8006 75 ml MIR 8080 NEW! RevIT? GMP AAV Enhancer 200 ml MIR 8200-GMP VirusGEN&reg; AAV轉(zhuǎn)染試劑及RevIT? AAV Enhancer For 1L of Culture MIR 8007 For 10L of Culture MIR 8008 TransIT-VirusGEN&reg;轉(zhuǎn)染試劑 0.3 ml MIR 6703 0.75 ml MIR 6704 1.5 ml MIR 6700 5 x 1.5 ml MIR 6705 10 x 1.5 ml MIR 6706 30 ml MIR 6720 TransIT-VirusGEN&reg; GMP級(jí)別轉(zhuǎn)染試劑 150 ml MIR 6845-GMP VirusGEN&reg; AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6750 VirusGEN&reg; GMP級(jí)別AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6815-GMP VirusGEN&reg; LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6760 VirusGEN&reg; GMP級(jí)別LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6825-GMP 新產(chǎn)品速遞 TransIT&reg;-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),基于Mirus Bio專(zhuān)利且成熟的聚合物和脂質(zhì)技術(shù)平臺(tái)上做開(kāi)發(fā),與單純基于聚合物(PEI)的轉(zhuǎn)染試劑相比,可進(jìn)一步提高 AAV 載體的產(chǎn)量,并允許降低一半的質(zhì)粒 DNA 用量。TransIT-AAViator 系統(tǒng)由新型 TransIT-AAViator 轉(zhuǎn)染試劑和 RevIT? AAV 增強(qiáng)劑組成。結(jié)合使用后,極大的優(yōu)化了AAV工藝生產(chǎn)中關(guān)鍵一環(huán)-上游轉(zhuǎn)染,最大限度提高 AAV 滴度,更多詳情敬請(qǐng)期待。 Mirus成立于1995年,始終秉承著為基因遞轉(zhuǎn)提供優(yōu)化方法及高效的工具。憑借超過(guò) 25 年轉(zhuǎn)染領(lǐng)域的深根細(xì)作,獲得了多項(xiàng)技術(shù)突破,已成為核酸遞送領(lǐng)域的全球領(lǐng)導(dǎo)者和值得信賴(lài)的品牌。Mirus科學(xué)家團(tuán)隊(duì)不斷突破轉(zhuǎn)染技術(shù)的極限,推出了VirusGEN&reg;轉(zhuǎn)染試劑與RevIT?增強(qiáng)劑,進(jìn)一步提升AAV/Lv產(chǎn)量,助力推動(dòng)生物治療藥物的降本增效,為CGT領(lǐng)域客戶(hù)賦能。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中國(guó)區(qū)總代理,始終秉承著專(zhuān)業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù),Mirus熱銷(xiāo)轉(zhuǎn)染產(chǎn)品常備現(xiàn)貨。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電北京西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

新品上市 | 舟帆生物SEC-HPLC通用流動(dòng)相

蛋白類(lèi)藥物如單克隆抗體和抗體偶聯(lián)藥物因具有極佳的治療效果與靶向作用正以火箭般的速度飛速發(fā)展,但這些藥物為患者帶來(lái)健康的同時(shí),也為藥品研發(fā)人員帶來(lái)更大的壓力。因其在諸多環(huán)境暴露下的不穩(wěn)定性,需要制藥科學(xué)家們對(duì)藥物質(zhì)量進(jìn)行持續(xù)監(jiān)控,以滿(mǎn)足生產(chǎn)和臨床需要。蛋白質(zhì)在制備,生產(chǎn)和運(yùn)輸存儲(chǔ)過(guò)程中可能面對(duì)著如凍融,高溫和震蕩的多重壓力,隨之而來(lái)的是對(duì)蛋白聚集體增多的擔(dān)憂(yōu)。蛋白聚集會(huì)影響藥物安全,嚴(yán)重的蛋白聚集還可能增加對(duì)患者的免疫源性風(fēng)險(xiǎn)。令人欣慰的是,分子排阻色譜法作為監(jiān)控蛋白類(lèi)藥物聚集體的有效檢測(cè)手段已經(jīng)成為一項(xiàng)金標(biāo)準(zhǔn)。我們使用ZF-LC-0001分子排阻色譜(SEC-HPLC)通用流動(dòng)相對(duì)單克隆抗體與抗體偶聯(lián)藥物進(jìn)行分析,獲得了令人非常滿(mǎn)意的效果。 目前SEC-HPLC方法已經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化,研究人員可以根據(jù)蛋白分子量選擇標(biāo)準(zhǔn)的商業(yè)化色譜柱進(jìn)行定量分析,但流動(dòng)相的選擇通常依賴(lài)經(jīng)驗(yàn)。這些流動(dòng)相一般為含鹽的水溶液,調(diào)配到一定的pH值后再進(jìn)行分析。然而含鹽流動(dòng)相在SEC-HPLC分析過(guò)程中會(huì)面臨容易長(zhǎng)菌的問(wèn)題,雖然在流動(dòng)相中加入0.5-1M氯化鈉會(huì)產(chǎn)生一定的抑菌效果,但效果有限且可能帶來(lái)鹽析堵塞儀器的風(fēng)險(xiǎn)。部分研究人員還會(huì)選擇在流動(dòng)相中加入少許疊氮化鈉來(lái)抑制細(xì)菌生長(zhǎng),但隨著化學(xué)品監(jiān)管逐漸嚴(yán)格,這項(xiàng)手段也成為不可能。在蛋白藥物研發(fā)階段,如預(yù)制劑處方開(kāi)發(fā)階段,往往需要進(jìn)行多處方篩選設(shè)計(jì)與全面的應(yīng)力實(shí)驗(yàn),這些應(yīng)力實(shí)驗(yàn)包括高溫、凍融、光照與振蕩,實(shí)驗(yàn)的全面設(shè)計(jì)會(huì)帶來(lái)分析量的增加,如一次頭碰頭SEC-HPLC分析會(huì)大于200個(gè)樣本(N=3),這使得液相分析的時(shí)間大于4天。通常,一個(gè)序列的分析中間不可以中斷,若意外中斷會(huì)帶來(lái)新的校準(zhǔn)和系統(tǒng)平衡,且中斷前的數(shù)據(jù)仍需要進(jìn)行質(zhì)量保證評(píng)估才可以使用。為了解決這一問(wèn)題,舟帆生物新推出了一款SEC-HPLC通用流動(dòng)相(貨號(hào):ZF-LC-0001),可以滿(mǎn)足樣品的持續(xù)分析,常規(guī)條件下十天之內(nèi)不會(huì)影響分析。 SEC流動(dòng)相抑菌效力對(duì)比 按照常規(guī)配方進(jìn)行配比制備本次實(shí)驗(yàn)所用不含舟帆生物特有配方流動(dòng)相。分別將對(duì)照組與 ZF-LC-0001流動(dòng)相(1×)罐裝至干凈透透明的1L流動(dòng)相瓶中,分別于0, 1, 2, 5, 10天時(shí)拍照留樣,記錄圖片如圖1所示。與對(duì)照組流動(dòng)相相比,ZF-LC-0001流動(dòng)相顯示出優(yōu)異的抗菌效力。結(jié)果顯示對(duì)照組流動(dòng)相于第1天即出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)異物,并于第2天現(xiàn)象加重,第5天取樣與第10天取樣拍照后發(fā)現(xiàn)兩者狀態(tài)相似。ZF-LC-0001流動(dòng)相直至第10天仍然保持清澈透明。此留樣階段的流動(dòng)相被用于后面實(shí)驗(yàn)的分析。 圖1. 常規(guī)流動(dòng)相與舟帆生物 ZF-LC-0001 流動(dòng)相抑菌效力對(duì)比 日內(nèi)精密度與日間精密度分析 使用ZF-LC-0001在常規(guī)分析環(huán)境下放置10天后的流動(dòng)相,對(duì)重組抗人ER2抗體因子單克隆 抗體樣品進(jìn)行日內(nèi)精密度與日間精密的分析見(jiàn)圖2。數(shù)據(jù)表明流動(dòng)相在放置10天后仍然有非常好的日內(nèi)精密度與日間精密度:[保留時(shí)間(Time)與總峰面積(mAU)分別為圖A, C],以區(qū)分序列間日內(nèi)的精密度。后3份于第2日進(jìn)樣一個(gè)輪次,與第1日第二輪次進(jìn)樣進(jìn)行日間精密度的對(duì)比(保留時(shí)間與總峰面積分別為圖B, D)。 圖2. 舟帆生物ZF-LC-0001流動(dòng)相日內(nèi)精密度和日間精密度 數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高 使用ZF-LC-0001分析重組抗人ER2抗體因子單克隆抗體8個(gè)進(jìn)樣量梯度的過(guò)程,R2=0.9999,數(shù)據(jù)表明,在儀器最大分析限度內(nèi),進(jìn)樣梯度的變化對(duì)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性影響較小。 圖3. 舟帆生物ZF-LC-0001流動(dòng)相線(xiàn)性及進(jìn)樣量與總峰面積數(shù)據(jù) 廣泛的樣品兼容性 使用ZF-LC-0001分析了5個(gè)單克隆抗體與2個(gè)抗體偶聯(lián)藥物的分子排阻色譜,我們將7個(gè)蛋白藥物全部使用純水稀釋至1mg/mL,統(tǒng)一進(jìn)樣,結(jié)果如圖4所示,表明了ZF-LC-0001流動(dòng)相無(wú)論在一般的單克隆抗體藥物或是疏水性較強(qiáng)的抗體偶聯(lián)藥物中均可以達(dá)到普適性分析的效果,并且對(duì)于低濃度進(jìn)樣,蛋白聚集體與單體仍然顯示出極好的分離度和分辨率。 圖4. 5種單克隆抗體與2種抗體偶聯(lián)藥物在低濃度下進(jìn)樣的SEC色譜圖 改善分析圖譜 除此之外,與常規(guī)流動(dòng)相比,使用ZF-LC-0001能獲得更加完美的峰形,如圖5所示,峰寬更窄,拖尾得到改善,這樣可有效避免為減少拖尾向流動(dòng)相中加入有機(jī)溶劑,從而進(jìn)一步避免溶液鹽析堵塞分析系統(tǒng),造成序列意外終止的風(fēng)險(xiǎn)。 圖5. 使用ZF-LC-0001與常規(guī)高鹽流動(dòng)相的SEC色譜圖對(duì)比(樣品分別為2種mAb與2種ADC藥物) 綜上所述,舟帆生物新推出的SEC-HPLC通用流動(dòng)相(貨號(hào):ZF-LC-0001)具有以下突出優(yōu)勢(shì): 卓越的抗菌能力,有效保護(hù)貴重儀器與高價(jià)值耗材不會(huì)在分析過(guò)程中受損;優(yōu)異的穩(wěn)定性,在分析條件下放置10天后仍能達(dá)到令人滿(mǎn)意的日內(nèi)和日間穩(wěn)定性與可觀(guān)的線(xiàn)性數(shù)據(jù);廣泛的樣品兼容性,適用于分析單抗、ADC、重組蛋白與多肽(此部分?jǐn)?shù)據(jù)未展示)等多種蛋白類(lèi)藥物;改善圖譜峰型,優(yōu)化拖尾問(wèn)題;使用方便,對(duì)人體無(wú)毒害且環(huán)境友好。 產(chǎn)品訂購(gòu)信息: 貨號(hào) 品名 規(guī)格 ZF-LC-0001 SEC通用流動(dòng)相試劑盒(10×) 1000 ml 試用申請(qǐng): SEC通用流動(dòng)相試用裝(100ml)火熱申請(qǐng)中,如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,請(qǐng)關(guān)注“西美杰微信公眾號(hào)”,發(fā)送關(guān)鍵詞“SEC”,填寫(xiě)問(wèn)卷即可獲得免費(fèi)試用機(jī)會(huì),數(shù)量有限,先到先得! 杭州舟帆生物科技有限公司成立于2018年,擁有一支高效的研發(fā)團(tuán)隊(duì),是一家專(zhuān)注于生物科技領(lǐng)域的公司。公司在蛋白質(zhì)藥品工藝開(kāi)發(fā)和優(yōu)化、分子診斷等領(lǐng)域擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)優(yōu)勢(shì)。我們的產(chǎn)品包括商業(yè)化毛細(xì)管凝膠電泳檢測(cè)試劑盒、高效液相色譜離子交換檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞培養(yǎng)試劑、分子診斷試劑等。這些產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域,與眾多知名研究機(jī)構(gòu)和企業(yè)建立了緊密的合作關(guān)系,共同推動(dòng)生物科技的發(fā)展和應(yīng)用。 北京西美杰科技有限公司是舟帆生物總代理,始終秉承著專(zhuān)業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電北京西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多產(chǎn)品信息。 參考文獻(xiàn): Liu JZ, Li L, Fang WJ*. A novel size exclusion chromatography method for the analysis of monoclonal antibodies and antibody-drug conjugates by using sodium iodide in the mobile phase. Pharm Res, 2024, in press. 更多>

星品推薦 | Agrisera光合作用抗體(Global antibodies)

植物光合作包括光能的吸收、能量轉(zhuǎn)換、電子傳遞、ATP的合成以及CO2的固定等步驟,這一過(guò)程主要在植物的葉綠體的類(lèi)囊體膜上完成的。類(lèi)囊體膜上存在四種關(guān)鍵的蛋白復(fù)合體:光系統(tǒng)II(PS II)、Cytb6/f復(fù)合體、光系統(tǒng)I(PS I)和ATP合成酶,這四種復(fù)合體協(xié)同作用,共同完成光反應(yīng)。光系統(tǒng)II上具有捕光色素復(fù)合體(LHC)構(gòu)成的天線(xiàn)系統(tǒng),可以捕獲光能,而光系統(tǒng)I則利捕獲后的能量進(jìn)行原初光化學(xué)反應(yīng)。Cytb6/f復(fù)合體在電子傳遞過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用,ATP合成酶則負(fù)責(zé)合成ATP,為植物細(xì)胞提供能量。 產(chǎn)品名稱(chēng) 貨號(hào) 實(shí)驗(yàn)類(lèi)型 ATP synthase AtpA | Alpha subunit of ATP synthase, chloroplastic AS08 304 IP,WB AtpB | Beta subunit of ATP synthase, chloroplastic + mitoch (rabbit) AS05 085 BN-PAGE,IF,WB AtpC | Gamma subunit of ATP synthase, chloroplastic AS08 312 WB Electron transfer Cyt b6/PetB | Thylakoid membrane cytochrome b6 protein, N terminal AS18 4169 BN-PAGE,WB Fd | Ferredoxin 1 (chloroplastic) AS11 1757 WB PetC | Rieske iron-sulfur protein of Cyt b6/f complex AS08 330 WB LHC Lhca1 | PSI type I chlorophyll a/b-binding protein AS01 005 WB Lhcb2 | LHCII type II chlorophyll a/b-binding protein AS01 003 IP,WB Lhcb3 | LHCII type III chlorophyll a/b-binding protein AS01 002 WB PSI (Photosystem I) PsaA | PSI-A core protein of photosystem I AS06 172 IG,WB PsaB | PSI-B core subunit of photosystem I AS10 695 WB PsaC | PSI-C core subunit of photosystem I AS10 939 WB PSII (Photosystem II) PsbA | D1 protein of PSII, C-terminal AS05 084 WB PsbB | CP47 protein of PSII AS04 038 WB PsbC | CP43 protein of PSII AS11 1787 WB 點(diǎn)擊查看更多抗體 應(yīng)用案例 AS09 522應(yīng)用示例 AS06 172應(yīng)用示例 Agrisera抗體發(fā)表文獻(xiàn) Sulli et al. (2023). Generation and physiological characterization of genome?edited Nicotiana benthamiana plants containing zeaxanthin as the only leaf xanthophyll. Planta . 2023 Oct 5;258(5):93. doi: 10.1007/s00425-023-04248-3. Ye et al. (2023). The light-harvesting chlorophyll a/b-binding proteins of photosystem II family members are responsible for temperature sensitivity and leaf color phenotype in albino tea plant. J Adv Res . 2023 Dec 25:S2090-1232(23)00404-6.doi: 10.1016/j.jare.2023.12.017. Penzler et al. (2024). A pgr5 suppressor screen uncovers two distinct suppression mechanisms and links cytochrome b6f complex stability to PGR5. Plant Cell. 2024 Mar 27:koae098. doi: 10.1093/plcell/koae098. Mu et al. (2024). Plastid HSP90C C-terminal extension region plays a regulatory role in chaperone activity and client binding.Plant J. 2024 Jul 5.doi: 10.1111/tpj.16917.Rubisco CO2的固定是利用光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP和NADPH合成有機(jī)物的過(guò)程,該過(guò)程稱(chēng)為卡爾文循環(huán)。1,5二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubisco)是CO2固定過(guò)程中的關(guān)鍵限速酶,催化CO2和RuBP(核酮糖-1,5-二磷酸)發(fā)生羧化、然后裂解形成兩個(gè)PGA(甘油酸-3-磷酸)分子。所有光合生物都具有由8個(gè)大亞基RbcL和8個(gè)小亞基Rbcs組成的I型Rubisco,且RbcL折疊到其天然狀態(tài)依賴(lài)于葉綠體定位的分子伴侶CPN60的作用。 產(chǎn)品名稱(chēng) 貨號(hào) 實(shí)驗(yàn)類(lèi)型 CAH3 | Carbonic anhydrase AS05 073 IF, IG, WB CPN60A1 | Chaperonin 60 subunit alpha 1, chloroplastic AS12 2613 WB CsoS1A/B/C | Major carboxysome shell protein 1A, AB, 1C AS14 2760 WB EPSP synthase | 3-phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase AS14 2782 WB EPYC1 | Essential Pyrenoid Component 1 AS19 4312 WB Lci5 | Low carbon dioxide induced protein number 5 AS05 090 IHC, WB NADP-ME | NADP-malic enzyme, chloroplastic (dicots/monocots) AS21 4580 WB PEPC | Phosphoenolpyruvate carboxylase AS09 458 IL, WB PEPCK | PEP carboxykinase AS07 241 WB PRK ribulose-5-P-kinase | Phosphoribulokinase AS07 257 WB RA | Rubisco activase AS10 700 WB RAF2 | Rubisco accumulation factor 2 AS13 2729 WB RbcL | Rubisco large subunit, form I (rabbit) AS03 037 IF, IG, TP, WB RbcL II | Rubisco large subunit, form II AS15 2955 IF, WB RbcS | Rubisco small subunit (SSU) AS07 259 WB RbcS | Rubisco small subunit (Algal) AS22 4825 WB Rubisco | 557 kDa hexadecamer AS07 218 IL, WB Rubisco ELISA quantitation kit AS15 2994 WB SBPase | Sedoheptulose-1,7-bis phosphatase AS15 2873 WB TKL1 | Transketolase (chloroplastic) AS15 2903 IP, WB Trxf1/2 | Thioredoxin F1/F2 (chloroplastic) AS14 2808 WB TrxM1/M2 | Thioredoxin M1/M2 (chloroplastic) AS14 2809 WB 點(diǎn)擊查看更多抗體 應(yīng)用案例 AS21 4580應(yīng)用示例 AS03 037應(yīng)用示例 Agrisera抗體發(fā)表文獻(xiàn) Phukan et al. (2024). Externally supplied ascorbic acid moderates detrimental effects of UV-C exposure in cyanobacteria. Photochem Photobiol Sci. 2024 Jul 12. doi: 10.1007/s43630-024-00612-8. Zhao et al. (2024). Psb28 protein is indispensable for stable accumulation of PSII core complexes in Arabidopsis.Plant J. 2024 May 26. doi: 10.1111/tpj.16844. Ciesielska et al. (2024). S2P2-the chloroplast-located intramembrane protease and its impact on the stoichiometry and functioning of the photosynthetic apparatus of A. thaliana. Front Plant Sci. 2024 Mar 15:15:1372318. doi: 10.3389/fpls.2024.1372318. 西美杰代理的瑞典Agrisera公司自1980年成立以來(lái),一直專(zhuān)注于開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的植物單克隆和多克隆抗體,并以其卓越的研發(fā)實(shí)力和生產(chǎn)技術(shù),在全球植物抗體領(lǐng)域占據(jù)著領(lǐng)導(dǎo)地位。其產(chǎn)品線(xiàn)覆蓋了廣泛的物種范圍,在A(yíng)grisera的產(chǎn)品目錄中包含了眾多模式植物和重要農(nóng)作物,如擬南芥、水稻、小麥、玉米和番茄等超過(guò)三十種植物,滿(mǎn)足各類(lèi)植物學(xué)研究需求的廣泛抗體庫(kù)。有眾多已發(fā)表文獻(xiàn)支持,確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。北京西美杰科技有限公司是Agrisera品牌中國(guó)區(qū)代理,致力于為國(guó)內(nèi)廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的免疫學(xué)產(chǎn)品和服務(wù)。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰全國(guó)客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄官方網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多信息。 更多>

about us關(guān)于我們

西美杰介紹

北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡(jiǎn)稱(chēng)西美杰)于2006年成立,由留美歸國(guó)生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅(jiān)持自己的經(jīng)營(yíng)理念,勤奮踏實(shí)地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案,幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時(shí)間... 更多>

brand代理品牌

在線(xiàn)客服

我們的營(yíng)業(yè)時(shí)間: 8:30-17:30

四虎影视完整版免费观看- 久久亚洲国产一区成人- 中文字幕一区二区欧美日韩 - 久久精品无码中文无一区二区- 欧美日韩欧美一区- 青青青爽国产视频在线观看- 亚洲不卡在线无码视频- 精品6999无码- 国产精华av午夜在线- 国产精品一精品二精品三- 97AV无码成人- 午夜在线精品不卡国产- 人妻无码视频一区二区三区99- 三级国产日本亚洲- 精品亚洲国产视频- 91精品麻豆啪在线观看- 国产东京在线视频- 尤物爱爱网色色一区二区三区三- 无码不卡免费毛片- 国产欧美在线不卡- 亚洲大香线伊人婷婷五月- 日本中文字幕亚洲乱码- 亚洲国产精品一区二区无码- 精品一区二区夜夜- 国模私拍视频在线观看- 亚洲综合色无码- 国产欧美影音先锋一区二区三区 - 一区二区免费精品在线观看国产- 国产精品欧美激情一区二区- 国产a网欧美午夜性视频- 国产一区高清ts- 男人天堂网av- 亚洲一二三区在线免费观看- 国产在线伊人视频- 国产亚洲成av人一级毛片- 日本人妻在线视频一区- 高清无码不卡AV在线观看- 国产一区二区在线免费观看- 天天做天天爱天天综合网- 国产精品线上观看- 欧美国产黄色一级- 99久久国产综合精品1- 亚洲第一第二区- 久久精品视频一- 欧美亚洲另类专区- 欧美另类在线亚洲- 8050午夜理论二级- 九九九九一区二区- 久久免费精品中文- 日本在线视频国产- AV大片免费观看- 欧美成人免费一区二区三区- 91亚洲精品综合久久- 囯模一区二区三区- 动漫毛片在线看- 最近国产精品牛牛- 成人精品无码一区二区三区- 精品女同一区二区三区亚洲- 国产精品v日韩精品v欧洲精品- 精品一区二区三区四区外站- 亚洲综合无码中文字幕- 精品国产一区在线观看免费- 亚洲精品综合久久中文字幕- 黄色大片一级久久- 成人性欧美丨区二区三区- 国产综合色产在线精品- 国产成人亚洲日本精品色戒- 国产精品99r8在线观看- 日本精品久久视频- 日韩乱码人妻一二三四区别在线- 欧美日本韩国一区二区- 午夜国产大秀视频- 69视频国产在线- 青青久伊人久伊人久伊人久- 97精品一区二区视频上线观看 - 日韩在线一区中文字幕- 超碰在线亚洲色图色偷偷- 久久精品国产精品亚洲- 国产免费变态视频网址网站- 亚洲高清免费观看- 成人中文字幕在线观看播放- 亚洲精品中文字幕电影- 国产AV无码乱码国产精品麻豆- 超碰在线观看99- 五月网站综合视频- 久久精品人成免费- 日韩一级免费视频- 在线精品亚洲第一区香蕉- 国产成人av码一二三区- 日韩有码在线观看- 国产精品v欧美精品∨日韩下载- 免费人妻中文字幕Av片- 少妇潮喷无码白浆水视频- 色国产在线观看- 又爽又黄又无遮挡动漫- 欧美国产日韩视频大全- 国内日韩精品天天更新- 91福利导航在线- 亚洲AV成人精品日韩一区- 91超碰日韩在线- 亚洲精品色午夜无码专区日韩- 91黄在线观看国产亚洲- 香蕉久久a毛片- 激情五月开心国产无码- 国产成人精品在线观看免费- 久久久xxxx- 国产综合a级片视频- 日本亚洲欧美一区二区三区- 亚洲日韩中文字幕在线- 国产在线观看一区- 久久精品韩国日韩精品- 亚洲无码影音先锋- 超碰在线观看97- 九九热亚洲精品综合视频- 九九机热只有精凯- 99精品久久久久- 人妻少妇av无码一区二区- 高清天天无码视频- 99精品视频国产一区二区三区- 国产精品真实对白精彩久久- 日韩一级在线播放- 亚洲一区二区在线观看网址- 日韩国产一级毛片- 亚州图片第一区- 免费亚洲精品三级- 久久精品无限国产2018- 最新亚洲中文字幕在线- 中文字幕乱视频- 精品一级A级毛片- 九九久久伊人网站- 亚洲无码内射人妻- 国产成人综合亚洲看片- 日本亚洲欧美在线视观看- 99热精品久久只有精品- 久久国产精品久久- 人人狠狠综合99综合久久- 丁香综合激情六月久久- 亚洲欧美在线不卡- 亚洲精品国产啊啊啊- 亚洲AV无码乱国产高潮- 无码一级毛片在线观看- 欧美在线视频一区- 国产又黄又大又粗视频欧美- 无码中字久久一区- 中文字幕亚洲日韩欧国无码- 久久精品色婷婷国产福利- 欧美日韩不卡视频- 亚洲天堂无码高清免费视频- 日本一区二区三区福利视频网址- 精品在线一区二区观看- 一区二区三区日韩国产在线播放- 国产精品乱码一区二区视频- 中文字幕无码人妻在线视频- 99热这里是精品- 亚洲成人无码一区二区三区 - 欧美制服丝袜国产另类- 国产美女精品A∨在线看- 国产高清内射无套颜射- 91无码人妻精品一区二区- 一本色道久久亚洲精品加勒比- 日本一区二区高清- 国产无码精品福利- 欧美日韩其他另类- 国产欧美日韩综合在线视频- 中文字幕成人视频- 中文字幕在线亚洲三区- 欧美福利视频99- 国产在线观看免费精品- 超碰免费国产在线- 一区二区三区亚洲综合- 国产精品~色哟哟- 亚洲 欧美 日韩 在线- 国产综合亚洲91- 日韩免费在线一区- 亚洲国产一区蜜臀- 欧美色图在线播放- 香蕉视频污下载- 国产在观线免费观看久久 - 日本欧美色综合网- 亚洲av网址在线- 日韩精品手机视频- 无码中文字幕视频- 亚洲一区成人欧美一级带- 欧美福利视频精品一区二区- 99久久精品亚洲- 亚欧洲国产av一区二区三区- 大香蕉男人天堂- 国产午夜精品大片网址- 一区二区三区国产美女精品视频- 中文字幕在线码一区- 国产日韩精品大片- 精品国产美女一级a爱- 在线亚洲国产一区二区三区- 欧美高清视频一区- 亚洲无码高清大片- 日韩超薄丝袜无码视频- 人人妻人人爽人人- 污污网站国产精品白丝袜- 亚洲国产精品成人av在线- 国产精品乱码高清在线观看- 欧美色中文字幕第一页- 国产无无码一区二区四区- 午夜免费视频91- 国产精品午夜在线播放a- 亚洲综合日韩无码- 亚洲天堂免费在线- 高潮被操出水视频欧美日本- 亚洲精品观看福利- 国产精品视频11- 超碰亚洲韩国日本- 日韩一级片的白- 国产成人精品无人区一区- 免费三级精品国产- 国产精品老女人精品视- AV天堂无码偷拍盗摄- 国产a级一区视频免费看- 精品国产91洋老外米糕- 亚洲国产精品视频一区二区三区- 久久精品香蕉国产欧美- 久久精品免视看国产视频- 超碰人人干人妻- 日韩欧美国产一二区- 超碰最新自拍偷拍- 国产无码能看的视频- 亚洲精品久久久久久中文- 国产免费不卡视频免費資訊- 国产中文综合无码- 亚洲精品69av区国产激情- 九九热精品国产- 国产人妖一区二区三区- 欧美成人精品一区二区秒拍- 免费超碰在线观看- 国产ⅴ亚洲ⅴ天堂a无码久久- 在线视频中文字幕一区二区- 国产三级精品美女三级- 一区二区精品久久- 亚洲Av网站网址免费观看- 午夜福利视频一区二区二区- 国产免费av大片大片在线播- 日本中文字幕一二区观- 91精品视频国产- 精品99少妇二区- 无码中文字幕在线免费观看视频- 国产微拍精品一区一再猛点- 国产日产欧美欧韩在线- 手机免费不卡在线观看视频毛片 - 国产亚洲欧美成- 日本综合久久一区- 精品久久不卡一本- 国产视频一二不卡- 日韩一区综合在线- 久久久97精品国产不卡- 91蜜桃高潮午夜福利视频- 最新国产精品 久- 日韩欧美久久久- 欧美日本精品一区- 日韩AV无码一区- 亚洲国产日韩精品- 国内日韩视频在线一区 - 免费国产日韩视频在线观看 - 免费高清一区二区三区视频不卡 - 九九夜色精品国产噜噜亚洲Av- 熟女无码一区二区- 欧美午夜精品在线- 日韩欧美国产黄色三级视频- 日韩欧美一区二区三区在线- 成人AV每日更新- 无码二区在线播放- 精品一区二区三- 成人午夜亚洲精品无- 美女福利视频久久- 日韩精品久久无码- 亚洲小说欧美激情另类- 国产男女猛视频在线观看- 亚洲小说欧美激情另类- 91久久精品国产综合另类专区- 亚洲视频免费观看- a天堂一区二区三- 亚洲综合精品VA- 日韩高清在线二区- 国产日韩aⅴ免费无码一区二区- 国产尤物成人精品一区- 中文字幕久久色- 国产精品欧美日韩激情在线- 妖精视频一区二区三区在线观看- 国产成人aⅤ三级在线观看- 国产成人亚洲欧美二区综合- 欧美精品成人专区- 精品6999无码- 国产成人一区二区三区久爱- 污软件不用会员- 亚洲欧美熟女成人无码免费视频 - 人妻丝袜无码专区视频网站- 国产精品真实对白精彩久久- 在线不卡视频欧美- 国产三女教师四区- 亚洲Av无码乱码囯产精第六区- 在线国内自啪精品视频- 在线看国产精品自拍- 日韩色无码久久- 亚洲精品偷拍无码不卡av- 亚洲一毛片在线免费好看- 99精品亚洲综合中文字幕无码乱码- 一区二三区国产- 国产成视频永久免费- 91久久无码人妻一区二区- 中国毛片免费看- 91精品欧美一区二区- 亚洲国产中文一区- 国产成人不卡av- 国产午夜在线高清一区二区- 日韩天天干天天- 久草AV一区二区- 国产免费高清无码一二三四- 青青草久久伊人- 白丝美女被爆操视频网站- 日韩精品在线第一页- 日韩专区国产99- 国产一级a免费视频- 精品久久久久粉嫩- 亚洲男人的天堂久久精品- 国语成人自产拍在线观看- 无码人中文字幕- 国产免费成人视频- 超碰97人频在线- 国产精品亚洲人在线观看- 国产综合色精品在线视频- 亚洲欧美91麻豆久久丁香- 午夜激情福利欧美- 特级毛片内射www无码- 欧美在线这里只有- 偷拍综合网五月天- 国产成人精品福利网站在线- 亚洲欧美人妻中文字幕- 久久性感主播视频- 久久久久久AV- 国产制服丝袜诱惑无码的网站- 真人色网色网视频毛片- 中文字幕色噜噜狠狠网站一区- 超碰精品久久AV- 久久国产综合视频精品- 亚洲丝袜av网站- 日本精品一区无码- 超碰超碰中文字幕- 中文字幕成人视频- 免费国产污网站在线观看不要卡- 国产一二三精品无码不卡在线- 午夜激情一级黄片视频- 无码一级毛片一区二区视频孕妇- 国产在线视频不卡一wx- 精品一区二区久- 亚洲AV色欲精品一区二区- 嫩草亚洲国产精品- 超碰人人操一区二区天天干- 亚洲精品成人无码一区二区 - AV在线人妻无码一区- 51精品人妻自拍第一页- 人妻激情一区二区三区- 五月一区二区综合- 欧美图区一区二区- 一本大道欧美在線观看丁香- 超碰人人操人人爽- 成人亚洲天堂一区- 亚洲午夜高清在线- 欧美日韩久久一区- 久久99日韩久久- 神马三级我不卡- 日韩精品久久一区- 国产精品美女久久- 日本aⅴ大伊香蕉精品视频- 超碰国产人人在线- 欧美另类在线视频- 日韩中文字幕二区三区- 日本高清一区在线- 国产精品vr无码专区- 欧美日韩在线精品一二区- 美女口交一区二区- 日韩久久高清无码- 一级毛片中文字幕免费- 最新国产成人高清- 日本不卡美女在线- 美日韩视频二区- 超碰一区二区高清- 成人午夜网站在线观看视频- 国产熟女一二三区- 超碰天天操天天干- 成人一级看99成人三级- 亚洲欧美资源在线观看- 国产精品麻豆99久久- 熟女福利久久熟女- 91精品在线播放黑丝- 成年人黄色毛片- 国产在线精品哟- 欧美亚洲另类专区- 国模一区无码樱花- 国产在线精品哟- 亚洲无码三四五区- 国产日韩精品高清- 精品国产污污网址- 国产福利在线观看视频- 无码一区二区三区免费看- 精品国产一区二区不卡区- 精品久久成年亚洲- 一级免费视频片高清无码- 8090午夜无码专区- 日本高清无码在线- 国产51自产区- 亚洲青青草原男人的天堂- 国产精品亚洲综合五月天- 亚洲日本人成网站在线播放不卡- 国产在线手机av- 无码精品欧日韩av观看- 亚洲欧美日韩国产一区- 中文字幕有码99- 中文字幕无码一二区- 精品视频国产激情- 国语高清无码一区- 日日夜夜精品视频- 日韩国产高清自拍- 亚洲精品自拍AⅤ在线观看- 日韩内精品久久人妻无码- 国产午夜精品三级- 日韩视频在线观看一区二区三区- 99国产在线观看- 亚洲专区欧美日韩- 国产成人亚洲久久- 大香蕉视频网国产在线- 成人精品亚洲一区_国产黄- 不卡无码人妻一区三区音频- 日本欧美亚洲韩国一区二区- 97人人模人人爽人人喊直播- 成人无码高清网站- 欧美图区一区二区- 国产主播国产精品自拍- 中文字幕无码人妻AAA片- 精品一级A级毛片- 国产女主播一区二区精品- 亚洲精品乱码久久久v开放时间- 99久久精品国产片久人- 久草国产视频一起- 国产三区四区在线- 亚洲精品久久伊人- 成人在线国产视频- 欧美日韩亚洲牛牛- 日韩毛片一级e片岛国无码- 日韩欧美亚洲一区精选 - 中文字幕无码一区二区三区免费- 亚洲理论福利一区二区三区- 国产精品成人一区二区三区漫画- 亚洲成无码电影- 成人一区在线精品- 亚洲中文字幕超麻- 国产无maav- 白丝美女被爆操视频网站- 日韩一区二区激情- 国产午夜亚洲精品理片不卡- 亚洲不卡在线视频- 欧美又大又粗一区二区- 日韩有码日韩无码- 久久综合色婷婷- 亚洲色图 综合- 欧洲精品视频一区二区三区- 一级毛片AAAAAA免费看- 99国产精品久久- 最新高清无码专区- 国产98超碰人人做人人爱- 欧美日韩在线视频一区二区播放- 国产精品制服丝袜一二区- 国产综合日韩在线观看- 免费三级精品国产- 国产日韩精品高清- 97精品国产91久久久- 免费成人在线视频不卡- 欧日韩不卡视频- 日韩网友自拍区- 国产三级视频播放线观看- 人人要人人爱av- 国产日本欧美综合- 国产精品无码激情- 伊人欧美一区二区- 欧美色图片亚洲资源在线- 亚洲三级精品视频- 日本香蕉视频在线- 精品国产亚洲无码- 91专区一区二区三区- 在线观看黄片国产- 亚洲一区二区国产视频- 日韩无码一二三区影片- 国产精品成人a区在线观看免费- 91亚洲国产系列精品- 在线播放亚洲国产欧美- 欧美视频国产区一区二区- 国产免费又黄又爽又色毛- 亚洲福利一区二区精品秒拍- 亚洲国产亚洲国产一区二区- 国产高清无码观看- !精品国产99久久久久久宅男- 亚洲精品资源久久- 香蕉视频在线观看亚洲一区- 日韩欧美视频一区二区在线- 久草视频在线首页- 国产毛片毛片精品- 国产Av无码专区- 亚洲AV深喉口爆一区二区三区- 国产网友自拍第1页视频- 日韩精品成人免费观看- 97超碰人人人人- 国产毛片毛片精品- 综合国产免费中文- 中文字幕色一波霸- 免费观看久久久久- 亚洲精品国产精品国在线- 无码美丽人妻日日- 午夜视频福利久久- 99久久精品自在自看国产- 精品三级黄色国产- 欧美日韩成人精品一区二区网址 - 久久久久无码中文字幕- 亚洲午夜久久久- 国产主播一区二区- 亚洲二区一区观看在线网站- 尤物黄色免费网址- 青青在线视频国产- 无码国产精品在线分类自拍- 激情成人综合网- 91免费黄色毛片视频- 日本久草一区二区- 高清一区二区久久无码精品- 日韩国产欧美一区二区三区- 亚洲免费a在线观看- 国产无遮挡乱子伦免费精品- 国产自产21区- 手机看片在线一区二区视频- 国产精品黄在线观看免费- 国内精品一级毛片国产- 国产成人精品午夜二三区91- 亚洲精品911- 天堂色中文字幕不卡一区- 亚洲国产小说在线观看- a一级毛片免费视频- 欧美日韩加勒比一区二区三区- 国产精品人妻一区二区三区在线- 性无码专区无码- 亚洲日韩欧美制服- 亚洲综合区激情区- 在线国产欧美自拍- 国语日韩欧美精品- 国产亚洲日韩a欧美在线- 海外一区二区黄色- 国产伦精品区一区二区三- 日韩欧美另类国产一区二区三区- 国产精品黄片AV- 国产无遮挡无套在线观看- 国产成人手机视频- 久久免费精品中文- 亚洲一日韩中文字幕视频- 亚洲国产精品自拍- 亚洲无码成人网站在线播放- 一区二区日韩欧美- 五月天亚洲视频- 最新日本一道免费一区二区- 日韩欧美一区二区在线- 精品黄色一区二区三区- 色欲Av无码一级- 五月天久久综合网- 国产一区二区久草- 色噜噜人妻丝袜av先锋音- 精品无码人妻少妇久久久久久- 成人一区二区三区四区在线播放- 国产无码专区一区- 综合成人精品久久- 欧美国产日韩三级- 久久亚洲国产成人无码AV- 韩日激情无码三区- 久久久久久99- 亚洲另类天堂一区二区三区- 成人免费观看片久久- 综合在线观看免费自拍- 大帝久久在线视频- 亚洲一区在线成人91- 日韩美女视频一区- 白白色免费视频- 国产欧美视频综合第一区- 青娱乐亚洲国产- 91热成人精品国产免费- 欧美日韩另类综合三级- 超碰免费av在线- 色拍自拍亚洲综合图区- 少妇高潮惨叫久久久久久- 亚洲精品自在久久- 午夜福利视频麻豆- 日本激情视频A∨一区- 亚洲国产精品热久- 91亚洲精品久久久久蜜桃- 亚洲中文字幕97精品- 国产免费无毒在线- 最新久久精品黄色域网- 综合久久国产对白- 自拍另类综合欧美中文字幕- 欧一美一色一伦一A片- 国产自偷自偷免费二区- 人妻夜夜爽一区二区- 亚洲成人娱乐网- 亚洲欧美精品在线观看- 黄色毛片一级片午夜性福利- 精品人妻人人做人人爽夜夜爽- 中文字幕无码午夜福利- 欧美日韩一级视频- 日韩精品尤物一区二区- 一级国产毛片在线- 国产精品va无码网址- 国内自拍真实伦在线视频- 黑人AV在线观看久草一区- 最新午夜福利视频网站- 超碰97久久人人- 国产成人无码在线播放视频- 尤物蜜芽在线视频亚洲一区- 国产熟女一二三区- 日本亚洲中文字幕- 一区二区三区四区视频一区- 国产永久视频四虎- 精品久久久无码中文字幕- 九热这里只有精品国产免费- AV在线不卡免费- 91丰满人妻无码AⅤ一区二区- 亚洲一区二区三区四区在线- 日韩有码一区二区- 亚洲综合中文高清- 无码一卡二卡三卡- 欧洲精品一二三区欧洲无码- 自蔚国产一区二区- a一级毛片免费视频- 日韩网友自拍区- 亚洲女人天堂在线- 人妖一区二区三区- 亚洲日韩激情在线一区- 亚洲欧美综合网- 欧美精品1区2区3区不卡- 亚洲精品有码视频- 久久性感主播视频- 国产高潮自拍av- 日本在线一区看片- 日本黄色区一区二- 欧美一区二区三- 日本熟妇中文在线视频网站- 午夜国人精品av免费看- 国产AⅤ无码专区亚洲版综合- 日韩视频中文字幕- 欧美v国产v日韩- 亚洲中文字幕无码一区在- 久青草免费视频- 国产成人福利毛片- 无码无套少妇毛多18P- 素人大屁股午夜小电影- 国产成人啪精品视频网- 亚洲av高清无码久久- 六月丁香综合在线视频- 日本免费超碰在线- 亚洲欧洲自拍拍偷午夜色- 一级国产航空美女毛片内谢- 日韩欧美小电影- 国产亚洲精品出轨- 最新2022国产精品国产精品 - 精品国语对白成人Aⅴ- 国产福利亚洲视频91- 亚洲中文无码视频在线观看- 久久伊人久久激情- 国产欧美日韩一级片免费看- 欧美乱码精品一区二区朱莉- 尤物爱爱网色色一区二区三区三- 国产精品一道本- AV在线精品一区二区亚洲- 69视频国产在线- 国产精品一区二区久久乐夜夜嗨- 99久久久码国产精品性- 国产欧美视频久久- 国产精品第页婷- 久久久综合精品一区二区- 国产精品欧美在线第一页- 亚洲中文日本久久精品- 国产精品臀控福利在线观看- 国产在线91精品资源- 亚洲一级中文字幕- 黄色小视频国产免费看- 国产精品微拍伊人- 亚洲一二三区视频- 激情五月天成人网- 水蜜桃av无码- 久久精品国产亚洲AV高清综合- 亚洲日韩一区二区三区中文字幕- 99不卡无码中文字幕在线- 欧洲在线视频一区- 国产成人一级二级- 天天日天天搞天天干天天摸- 中文无码乱人伦- 欧美日韩综合在线- 国产高清女人流白浆 - 鸥美无码一区二区- 久久99久久精品久久久久久- 一级a一片久久无码免费动漫- 欧美一区二区乱伦- 日本高清免费观看- 欧美精品中文字幕久久二区- 首页欧美国产日韩- 国产无码在线观看精品- 国在线一区二区免费视频- 日本视频在线观看国产- 91国在线观看- 欧美日韩在线观看一区成人漫画 - 九热这里只有精品国产免费- 超碰人人在线一区- 人妻无码不卡中文字幕在线- 天天综合网在线- 成人无码一区二区日韩精品- 免费在线黄色网- 蜜臀久久棈精品久久久久久- 欧美成人一二三区- 最新中文字幕国产在线- 四虎精品成人免费视频- 无码福利一区二区三区- 亚洲成人网站在线 手机版- 国产A级毛片不收费- 日韩成人中文字幕- 亚洲无码日韩AV- 亚洲人妻不卡一区二区三区- 日韩欧美精品小视频- 92无码精品人妻一区二区- 亚洲欧美日韩综合- 黑丝一区二区三区- 久视频成人网站色- 视频二区一区国产精品天天- 亚洲女同一区二区- 久久精品国产在热2019- 国产高潮成人免费视频在线观看- 一级一片免费看- 丰满熟妇乱又伦- 久久综合热这里只有精品- 国产丝袜不卡丝袜在线- 网站国产精品亚洲- 国产精品二区在线免费观看- 久99久只有精品- 久久久久久香国产- 日韩亚洲天堂精品- 国产欧美日本精品- 日韩精品99久久久久中文字幕- aV乱码精品一区二区- 国产日本久久影视- 久久中文字幕亚洲- 有码视频日韩精品- 青青国产成人精品视频- 欧美一级在线观看- 亚洲一区二区日韩精品- 精品999久久久- 国产午夜一级视频在线观看 - 国产在线观看黄片- 久久久久久国产一级毛片- 国产日韩丝袜无码- 国产精品久久久久久无遮挡- 91久久久无码精品不卡A片- 亚洲伊人亚洲伊人- 精品在线视频91- AV在线人妻无码一区- 老司机噜噜噜精品无码- 国产微拍精品一区一再猛点- 国产高清精品在线91- 欧美精品a级视频- 亚洲无码在线视频观看- 毛片网站在线看- 欧美日韩精品久久系列- 清纯唯美亚洲欧美五月- 国产熟女二区四区- 5月激情久久久- 亚洲天堂久久一区二区- 无码成a∧人片在线播放- 人妻熟女一二三区夜夜爱- 久久久久亚洲综合- 国产一区二区与动漫av- 尤物在线精品视频- 91亚洲精品色午夜麻豆- 日韩高清在线精品观看一区二区- 欧美精品一国产成人综合久久- 加勒比无码av一区二区久久- 国产91精品影- 日韩精品福利一区- 日本中文字幕五月天- 欧美日韩高清在线- 无码一区在线视频- 超碰在线人人人摸- 欧美在线第一日韩视频- 久草AV一区二区- 国产91在线中文- 日本韩国在线精品- 97超碰精品在线- 日韩精品中文高清一区- 在线观看一级片- 久久九九精品欧美日韩精品- 日韩一区二区不卡高清- 亚洲欧美日韩国产国产a- 精品午夜成人AV- 精品国产熟女一区二区三区- 国产综合av一区- 色欲视频综合免费天天- 中文无码视频播放- 人人妻人人澡人人爽人人爽- 久热这里只精品国产8- 日韩精品伊人久久- 一级毛片无码精品刺激- 国产一区二区三区久久精品小说- 无码影视国产亚洲- 国产视频一区免费在线观看- 亚洲高清中文字幕- a级野外无码在线精品- 亚洲国产AV一区二区三区- 国产亚州精品Av- 精品免费人伦一区二区三区蜜桃- 成人国产精品av- 亚洲国产精选av- 日日摸夜夜摸91- 久草手机综合在线- 久草视频精品在线- 欧美日韩国产在线观看成人欧美- 91视频网站一区二区三区- 色国产精品妇射- 欧美一区二区影音先锋男人- 超碰免费中文字幕- 91无码人妻精品一区二区- 亚洲日本天堂久久- 中文字幕国产一区在线观看- 久草视频在线亚洲- 国产美女流白浆视频99- 黄色成人日韩在线- 国产日韩欧美午夜福利综合- 亚洲视频第一页- 国产国语口爆在线免费视频- 大香蕉网黄色片- 色综合91欧美极品一区- 精品女同一区二区免费视频- 无码久久国产视频- 欧美日韩国产网站在线观看- 亚洲色图第1页- 高清一区二区黄色播放视频- 久草国产熟女一区- 中文字幕一区二区三区四虎在线- 欧美爽少妇一区二区- 中文字幕无码一二区- 一级久热爱精品视频- 亚洲制度中文字幕- 亚洲精品制服校园无码- 日韩有码精品视频- 熟女精品一区二区三区- 日本精品视频区- 日韩另类黄色天堂- 亚洲无码在线视频一区二区- 国产亚洲网站大全- 国产在线无码AV- 日韩欧美小电影- 污网址在线观看- 中国三级网站另类- 亚洲AV深喉口爆一区二区三区- 久久大香伊人中文字幕- 日本精品久久人人- 免费一区二区三区- 亚洲无码最新首页- 99久久亚洲综合网精品- 香蕉视频污下载- 国产精品免费看久久久香蕉- 久久AV午夜福利精品- 亚洲精品熟女一区二区三- 国产在线看va- 日韩欧美亚洲三区- 免费黄免视频无码- 影音先锋5566资源- 人体射精一区二区- 日韩欧美国产精品成人- 日韩精品中文字幕在线视频- 国产午夜福利一区视频- 亚洲无码久久网站- 亚洲一码二码在线- 国产微一区视频在线观看- 亚洲在线免费观看- 日韩欧美国产视频- 亚洲精品麻豆专区- 国产AV无码一区二区高清无码- 亚洲精品中文字幕电影- AV网地址在线看- 国产国模精品一区- 久久国产高清视频- 国产成人综合视频- 蜜桃一区二区三区- 久久免费观看国产精品- 男人av资源站- 久久精品免费播放- 线二区中文无码- 性国产欧美精品- 久久国产精品久久- 精品中文字幕无码在线- 国产激情一级毛- 欧美一区二区在线观看免费网站- 最新免费av网站在线观看- 精品国内久精免费视频- 中文字幕视频在线播放- 国产成人精品一区二区三区福利- 日韩视频 中文字幕在线看- 夜夜春无码视频- 老司机精品一区在线视频- 国产精品不卡一区- 9久久国产精品资源- 国产在线欧美精品中文一区- 亚洲精品国品乱码久久久- 日韩欧美精品三级- 国产精品自在线拍毛片- 无码人妻一区二区三区在线播放- 婷婷五月天在线观看- 日韩AV不卡二区- 日韩不卡一区=区- 亚洲Av无码乱码观看富二代- 中文字幕亚洲精品资源网- 国产91黄色在线观看- 一本无码不卡在线- 亚洲成人无码av- 香蕉视频欧美在线- 亚洲视频在线观看一级片- 这里只有精品在线- 中文字幕人妻欧美- 日韩欧中文字幕- 亚洲无码影视福利- 女同精品一区二区- 色欲网天天无码AⅤ视频- 欧美天堂不卡一区二区视频- 国产黄片精品在线观看- 一区二区成人毛片免费视频- 视频二区在线播放- 亚洲国产精品素人在线观看- 成人在线视频无码- 国产精品第6页- 国产欧美综合精品- 国产自偷自拍一区- 在线视频中文字幕在线一区- 精品日韩专区在线视频- 成人永久免费视频网站- 亚洲AV无码国产日韩一二区- 国产图片一区二区- 中文字幕在线一区- 精品国产中文乱伦- 国产精品福利一区二区在线观看- 日本大蕉香蕉大视频在线观看- 99欧美成人精品高清- 亚州手机成人在线- 91精品国产aⅴ一区二区- 亚洲字幕成人中文在线观看- 亚洲视频中文字母- 成人在线毛片观看- 三级国产在线观看- 亚洲人成人在线- 色婷婷色综合一区二区- 欧美综合国产日本- 午夜国人精品av免费看- 精品丰满熟女一区二区蜜桃- 成人午夜福利影音- 亚州国产精品无码- 亚洲区无码dvd在线- 亚洲综合日韩精品视频网- 亚洲国产免费综合- 91专区一区二区三区- 亚洲成人手机在线- 亚洲午夜理论福利在线观看 - 国产精品一区二卡- 亚洲精品人妻在线- 亚洲精品老黄在线观看- 日本日韩欧美在线- 影音欧美中文字幕- 日本高清欧美国产- 亚洲男人片片在线观看- 亚洲国产日韩视频中文字幕在线观看 - 在线亚洲精品国产成人- 亚洲亚洲综合精品一区二区- 国产成人综合亚洲高清- 东京热 综合在线- 中国三级网站另类- 亚洲一级片在线观看- 国产伦子沙发午休- 超碰总站久久久久- 亚洲国产日韩欧美久久- 亚州另类91福利视频网- 黄色无码在线观看视频- 亚洲另类欧美久久- 日韩欧美先锋影音- 日韩视频在线播放不卡- 国产91共享福利- 亚洲欧美制服第一页- 最近免费高清观看mv- 一区二区va在线- 综合中文高清三级- 高清精品一区二区三区- 国产精品伊人久久- 91亚洲精品久久久久蜜桃- 日本中文在线一区- 亚洲欧美中文字日韩二区- 无码中文字幕一区二区三区九九- 午夜国产大秀视频- 精品一级A级毛片- 超碰免费公开在线- 国产一区二区三区精品蜜臀- 日本一区欧美久久- av日韩无码一区- 国产欧美日韩区二区三区- 久久精品国产亚洲AV香蕉- 国产精品制服丝袜亚洲欧美- 亚洲精品日韩视频在线- 亚洲天堂人妻无码日韩- 亚洲精品日韩视频在线- 午夜福利片一区二区三区- 日日澡夜夜澡人人高潮- 亚洲无码人妻一区- 久加勒比亚洲精品- 亚洲中文久久久无码精品- 苍井空一区二区- 日本精品亚洲一区二区三区- 日韩欧美成人大片一区二区三区- 国产日产欧美在线视频- 亚洲成aⅴ人在线视频- 96视频精选国产- 日韩一区欧美国产- 亚洲欧美在线不卡- 免费一区二区三区在线观看- 亚洲精品有码在线观看- 99精品久久久- 亚洲AV无码专区在线厂- 99免费人妻视频观看- 亚洲精品国产啊啊啊- 精品在线观看一- 亚洲a视频在线- 久久久无码视频- 欧美日韩综合在线- 亚洲AV无码乱码国产精视- 国产在线欧美色图- 日韩欧美中文字幕不卡- 国产偷v国产偷v亚洲- 亚洲精品一级毛片A精品∨一级毛片 - 高潮被操出水视频欧美日本- 99国产成人综合久久精品免费- 欧美国产亚洲视频- 国产成人精品免费视频下载- 欧美a在线播放- 亚洲久一久二久三- 国产美女激情视频无打码- 免费特级黄毛片- 超碰人人在线一区- 99中文字幕久久- 日韩精品中文字幕永久- 精品AV在线观看- 久久久夜间小视频- 一区精品二区国产三区日韩- 成人精品一区二区激情- 激情久久一二三区- 韩国AV片永久免费网站- 亚洲欧美色中文字幕在线- 91久久五月婷大狼蕉- 无码 一区 四区- 欧美日韩午夜在线播放- 综合久久久久久久- 久久99国产99- 极品嫩模艾小青高潮潮喷- 超碰最激烈的国产- 成人国产精品一区二区在线观看- 亚洲欧美激情网站- 日韩人妻无码一本二本三本- 手机在线看片无码- 国产午夜精品每日更新- 在线视频一区二区三区四区- 国产美女露脸作爱视频- 国产一级精品AV一区二区- 日韩欧美日韩一区- 国产做做无码福利- 久久精品国产在热2019- 超碰在线不卡av- 亚洲中文字幕无码久久不卡- 成人午夜福利影音- 日韩国产高清网站- 亚洲精品亚洲精品午夜- 国产一级无码中文字幕- 自拍偷拍亚洲无码- 欧美日韩一区二区综合五月- 亚洲欧美国产另类首页- 国产人妖一区二区三区- 日韩人妻一区二区三区- 一区二区三区国产- 国产大片一级二区- 国模无码一区二区- 国产精品资源网站- 日韩精品一区二区三区四天- 人妻精品一区二区三区91- 91福利区久久久一区二区- 亚洲国产高清美女在线观看- 亚洲欧洲国产Av- 日韩AV无码二区- 国产三区成人97- 99久久精品一区二区毛片吞精- 国产精品99久久久久久有的能- 亚洲国产欧美韩日- 九九热在线精品- 免费看的无码网站- 亚色中文91在线- 亚洲日韩欧美第一香蕉- 国产欧美高清精品一区2- 亚洲一区二区性爱无码- 国内欧美日韩在线- 亚洲精品成人无码AV在线播放- 日韩精品女同一区二区在线观看- 91精品最新国自产拍在线观看- 亚洲美女视频一区二区三区四区- 99在线看精品亚- 国产高清亚洲精品- 国产精品黄色女人视频- 亚洲无码国产一二三区久久久 - 热视频精品在线视频精品- 久久久伊人网精品- 亚洲欧美一区二区三区不卡- 亚洲第一综合网站- 激情四射在线网址- 久久国产精品免费精品- 精品视频香蕉尹人在线- 91亚洲视频在线观看- 国产无码精品午夜福利- 亚洲永久精品大片WW免费- 日本欧美国产综合- 午夜视频一区三区- 另类日韩国产欧美- 久久久久久香国产- 日韩欧美大片字幕一区- 69无码精品视频- 玖玖资源视频欧美- 久久香蕉视频一区- 亚洲五月六月激情- 精品欧美99一区无码视频- 午夜福利视频91- 精品国语对白成人Aⅴ- 亚洲区欧美中文字幕久久- 精品午夜国产福利观看- 国产顶级毛片基地- 熟妇人妻久久中文字幕- 亚洲五码永久久久- 香蕉av秘 一区二区三区色欲- 一区二区在线免费观看-