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新品上市| hPSC誘導(dǎo)分化骨骼肌試劑盒

  人類多能干細(xì)胞(hPSCs)包括人類胚胎干細(xì)胞(hESCs)和人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSCs)。這類干細(xì)胞具有無限自我復(fù)制多項(xiàng)分化潛能,再生醫(yī)學(xué)、疾病建模和藥物篩選研究的重要工具。近年來,研究人員已開發(fā)出多種方案,通過導(dǎo)入外源基因或者利用小分子誘導(dǎo)等方法,將人類多能干細(xì)胞分化為骨骼肌細(xì)胞SkMCs),從而骨骼肌損傷肌營養(yǎng)不良等肌肉相關(guān)疾病的研究和藥物篩選提供了新的途徑。雖然目前有許多方法可以將hPSCs分化成SkMCs但大多數(shù)方法都涉及到3D球狀胚體的形成以及細(xì)胞分選,過程復(fù)雜,難以獲得肌原細(xì)胞,骨骼肌形成低,很大程度上影響了肌肉再生醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展。如能在“hPSCs分化為骨骼肌”研究方面取得突破能為細(xì)胞療法或藥物篩選帶來充足的肌細(xì)胞,例如肌營養(yǎng)不良患者體內(nèi)取出干細(xì)胞分化產(chǎn)生的肌原細(xì)胞,可為患者的提供很好治療原料,同時(shí)還能對(duì)這類肌肉相關(guān)性疾病進(jìn)行深入的研究因此,如何構(gòu)建一個(gè)高效的體外性祖細(xì)胞分化平臺(tái)是突破肌肉再生醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的一個(gè)關(guān)鍵技術(shù)瓶頸。

 這里小編為大家推薦一種非常簡單高效,僅需三個(gè)步驟就能將hPSCs分化為成熟骨骼肌細(xì)胞的新方法——來自Myocea公司Skeletal Muscle Differentiation Kit(hPSC誘導(dǎo)分化骨骼肌試劑盒。該方法優(yōu)點(diǎn)是僅需要單層細(xì)胞培養(yǎng)就可以制備大量的SkMCs,無需表達(dá)肌原性轉(zhuǎn)錄因子或細(xì)胞分選等額外操作。由于成肌祖細(xì)胞和成肌細(xì)胞具有很高的增殖能力,可以通過常規(guī)傳代方式進(jìn)行大規(guī)模擴(kuò)增,從而獲得大量分化的肌管細(xì)胞。因此,該方法非常簡單高效,并且適用于自動(dòng)化和大規(guī)模生產(chǎn)。實(shí)驗(yàn)表明,僅用6×104個(gè)hPSCs就可以生產(chǎn)出7.5×107個(gè)SkMCs,說明了該方法有很高的效率和可擴(kuò)展性。

      

 Myocea的Skeletal Muscle Differentiation Kit是世界首款能將hPSCs分化為骨骼肌細(xì)胞的商品化培養(yǎng)基系統(tǒng),由四個(gè)培養(yǎng)基組成通常情況下,從人多能干細(xì)胞生成肌細(xì)胞需要3個(gè)階段(如上圖),即依次生成衛(wèi)星樣祖細(xì)胞(satelite-like progenitor cells)和成肌細(xì)胞(myoblasts),最后融合成為多核肌管細(xì)胞(multinucleated myotubes)。因此Skeletal Muscle Differentiation Kit包含了個(gè)分化階段所需的三種培養(yǎng)基,此外還提供了一個(gè)促進(jìn)肌管融合培養(yǎng)基作為可選組分,根據(jù)研究者希望得到的細(xì)胞表型靈活選擇。骨骼肌分化系統(tǒng)的四個(gè)培養(yǎng)基詳情見

貨號(hào)

品名

SKM01-250mL

Skeletal Muscle Induction Medium (Stage I)

SKM02-250mL

Skeletal Myoblast Medium (Stage II)

SKM03-250mL

Myotube Medium (Stage III, Option 1)

SKM03+-250mL

Myotube Fusion Medium (Stage III, Option 2)

 

 用該培養(yǎng)系統(tǒng)分化生成細(xì)胞通常由70-90%肌管細(xì)胞和10-25%的肌前體細(xì)胞組成。如下圖細(xì)胞標(biāo)志染色顯示細(xì)胞表型成熟且功能完整。

https://www.amsbio.com/wp/wp-content/uploads/2020/01/sketetal-muscle-differentiation.jpg

更重要的點(diǎn),通過標(biāo)志核酸與蛋白表達(dá)水平比對(duì)發(fā)現(xiàn),該方法具有很高的可重復(fù)性,幾株不同的細(xì)胞系分化實(shí)驗(yàn)比對(duì)顯示差異很小,穩(wěn)定性非常好。因此,Skeletal Muscle Differentiation Kit適用于高通量篩選和藥物開發(fā)。

綜上所述,Skeletal Muscle Differentiation Kit包括以下優(yōu)勢(shì)特點(diǎn),確實(shí)是一個(gè)令人心動(dòng)的骨骼肌分化方案。


  •  肌細(xì)胞生成。
  • 三步法操作簡單,無需細(xì)胞分選無需表達(dá)肌原性轉(zhuǎn)錄因子。
  • 實(shí)現(xiàn)了成肌細(xì)胞的擴(kuò)增和儲(chǔ)存,從而建立可再生肌細(xì)胞。
  • 方法穩(wěn)定,重復(fù)性好。


Myocea, Inc.是一家專注于提供神經(jīng)肌肉疾病領(lǐng)域產(chǎn)品與服務(wù)公司,是能夠為相關(guān)制藥企業(yè)提供專業(yè)試劑合同服務(wù)的學(xué)術(shù)戰(zhàn)略合作者。Myocea公司目前世界上擁有最大的人類胚胎干細(xì)胞細(xì)胞庫之一,并已發(fā)和推出了世界首款穩(wěn)定、高效且可擴(kuò)展的專業(yè)骨骼肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基系統(tǒng)。

北京西美杰科技有限公司是Myocea品牌中國區(qū)總代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。如對(duì)以上產(chǎn)品感興趣,歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006登錄網(wǎng)站m.zhaoyouran.cn了解更多信息。

 

參考文獻(xiàn)

A Human Pluripotent Stem Cell Model of Facioscapulohumeral Muscular Dystrophy-Affected Skeletal Muscles. Stem Cells Transl Med. 2016 Sep;5(9):1145-61.

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